中山大學附屬第一醫院何偉玲/王子洋團隊、廣州大學王雄軍團隊、珠海市人民醫院陸驪工團隊聯合在Science Advances發表題為 ACSL6-activated IL18R1-NF-κB promotes IL18-mediated tumor immune evasion and tumor progression 的研究論文。研究發現ACSL6在肝癌發病機制中是一個潛在的適配器，激活IL- 18-NF - κB軸介導的腫瘤免疫逃避，為開發有效的癌癥免疫治療策略提供了有價值的見解。

肝癌是世界上第六大常見的癌癥，由于其高復發和高轉移率，導致肝癌患者的總體生存率較差。免疫檢查點抑制劑（ICIs）已成為晚期肝癌的主要治療藥物，然而，只有20%至30%的肝癌患者對免疫治療有反應。近期研究表明，IL-18信號的異常激活調節腫瘤的免疫逃避和進展，但其潛在機制尚不清楚。長鏈?；o酶A （CoA）合成酶（ACSLs）由ACSL1、ACSL3、ACSL4、ACSL5和ACSL6五種異構體組成，是催化脂肪酸活化的第一步，促進隨后的脂肪酸分解代謝和合成代謝的關鍵酶。大量研究表明，ACSL上調與腫瘤進展有關，但具體作用機制有待進一步探究。

1、ACSL6通過與IL-18R1形成復合物激活IL-18-IL-18R1-NF-κB通路

首先，作者明確了ACSs在肝癌中的功能，發現ACSL6在肝癌中上調，其高表達與肝癌患者預后不良相關；ACSL6在肝癌中促進腫瘤生長和轉移，而不依賴于其酶活性。為了研究ACSL6促進肝癌進展的機制，作者進行了質譜分析和共免疫沉淀實驗，發現IL-18R1在肝癌細胞中與ACSL6相互作用，這種相互作用在IL-18刺激下得到加強，并且不依賴于ACSL6酶活性。進一步探究ACSL6與IL-18R1相互作用的機制，發現ACSL6和IL-18R1在細胞膜上共定位并相互作用，IL-18刺激誘導ACSL6易位到膜上，與IL-18R1形成復合物。IL-18R1作為IL-18的受體，將IL-18信號從細胞外傳遞到細胞內，激活NF-κB通路。進一步實驗發現ACSL6在IL-18刺激下激活了NF-κB信號通路，ACSL6通過募集IL-18RAP，增強IL-18R1與IL-18RAP之間的相互作用，從而激活IL-18R1-NF-κB信號通路，促進肝癌細胞的增殖和遷移。

2、IL-18誘導ACSL6 pS674易位，從而激活IL-18R1-NF-κB信號通路

IL-18刺激導致ACSL6和IL-18R1相互作用和ACSL6膜定位的機制尚不清楚。磷酸化是一個重要的翻譯后修飾，在信號級聯中調節蛋白質功能或亞細胞位置。為了確定ACSL6是否在IL-18刺激下發生翻譯后修飾，作者檢測了ACSL6的磷酸化、泛賴氨酸甲基化和泛賴氨酸乙?；＝Y果表明，在IL-18刺激下，只有ACSL6的絲氨酸磷酸化增加。進一步實驗發現ACSL6 S674磷酸化（pS674）通過促進IL-18R異源二聚體形成來調節IL-18信號傳導的適配器功能。接下來，作者研究了ACSL6 pS674的激酶，ERK1/2抑制劑能減弱IL-18誘導的ACSL6 pS674，ACSL6與ERK2結合，但不與ERK1結合。體外激酶測定發現ERK2能直接磷酸化ACSL6 pS674，表明ERK2是ACSL6 pS674所必需的。進一步結果表明ACSL6作為連接IL-18信號和NF-κB激活的適配器，促進肝癌的進展。

3、ACSL6 pS674促進TANs和TAMs的募集，從而促進IL-18介導的腫瘤免疫逃逸

作者推測ACSL6可能參與了IL-18介導的免疫逃避。通過查詢TCGA數據庫中肝癌患者的公開轉錄組數據，發現ACSL6與CD8⁺ T細胞水平呈負相關，可能在肝癌中促進免疫逃避。進一步研究ACSL6 pS674是否會影響微環境中ACSL6可能的腫瘤細胞外源性功能，發現ACSL6抑制CD8⁺ T細胞的浸潤和活化。免疫抑制細胞，如腫瘤相關中性粒細胞（TANs）和腫瘤相關巨噬細胞（TAMs），已被報道通過抑制CD8⁺ T細胞的浸潤和活化來誘導免疫抑制作用并促進腫瘤進展。作者研究了TANs和TAMs在TME中的浸潤，發現ACSL6 pS674是TANs和TAMs募集所必需的，從而促進肝癌的免疫逃逸并促進腫瘤進展。為了驗證ACSL6在腫瘤免疫逃避中的作用，作者建立了肝癌小鼠，并注射靶向Acsl6基因的AAV8-miR30-shRNA（AAV8-shAcsl6）以敲低Acsl6的表達。結果發現在肝癌小鼠中注射AAV8-shAcsl6的可阻斷腫瘤進展，肝臟重量、肝臟重量/體重比和腫瘤數量均下降，而過表達Acsl6的小鼠出現了大量的腫瘤負荷。Acsl6的下調促進了CD8⁺ T細胞的浸潤，抑制了TANs和TAMs的募集，Acsl6過表達顯著降低CD8⁺ T細胞浸潤，增加TANs和TAMs募集，提示Acsl6促進腫瘤免疫逃避。

本研究發現ACSL6在肝癌發病機制中是一個潛在的關鍵致癌因子。ACSL6促進IL-18介導的腫瘤生長、轉移和免疫逃避，獨立于其代謝酶活性。機制上，在IL-18刺激下，ACSL6在S674位點被ERK2磷酸化，并招募IL-18RAP與IL-18R1相互作用，從而增強IL-18R1-IL-18RAP異源二聚體，觸發NF-κB依賴性基因表達，促進腫瘤發展。