慢性腎臟病（chronic kidney disease，CKD） 是全球公共健康問題^[1]，全球CKD患病率高達13.4%以上，呈現逐年上升的趨勢^[2]。腎臟纖維化（Fibrosis）是形成CKD的關鍵病理原因，作為多數慢性腎臟病的終末期表現，如果放任纖維化的持續發展，會造成多器官功能障礙，最終導致多器官衰竭而亡，目前尚無有效治療策略。為了深入研究腎臟纖維化的發病機制以及開發新的治療方法，建立可靠的腎臟纖維化疾病模型至關重要。

TGF-β1重組蛋白常用來體外誘導人腎小管上皮細胞（HK-2），從而構建腎間質纖維化細胞模型。近岸蛋白提供高活性，高批間一致性的人TGF-β1重組蛋白，助力您的纖維化建模實驗。

Measured by its ability to inhibit the IL-4-dependent proliferation of TF?1 human erythroleukemic cells. The ED50 for this effect is 4-40 pg/ml.

臨床上常見肺纖維化、腎纖維化、肝纖維化、心肌纖維化等病癥，纖維化也是導致多種疾病發病率、死亡率升高的主要原因之一。盡管發病的病灶各不相同，其發病原因大同小異，均是由于膠原蛋白（collagen）、纖維粘連蛋白（fibronectin, FN）、α-平滑肌肌動蛋白（alpha-smooth muscle actin, α-SMA）等細胞外基質（extracellular matrix, ECM）過度堆積，導致成纖維細胞向肌成纖維細胞分化、炎癥介質分泌增加，最終造成不可逆的器官纖維化。

TGF-β信號通路是驅動腎臟纖維化的核心機制，其通過配體（以TGF-β1和β3為主）與Ⅱ型受體（TGFR2）結合，激活經典Smad依賴通路：TGFR2反式磷酸化激活Ⅰ型受體（TGFR1），后者磷酸化Smad2/3并形成Smad2/3-Smad4三聚體復合物入核，直接調控靶基因表達^[3]。該通路通過多靶點促纖維化作用導致病理進展：一方面上調細胞外基質（ECM）合成基因（如膠原、纖連蛋白）并抑制其降解（抑制MMPs、促進TIMPs分泌），打破ECM代謝平衡；另一方面誘導腎系膜細胞增殖分化、內皮細胞肥大凋亡，并通過上皮/內皮-間充質轉化（EMT/EndoMT）激活肌成纖維細胞，同時參與表觀遺傳修飾（如Smad3-HDAC復合物介導的基因甲基化）。這些機制協同促進ECM過度沉積、肌成纖維細胞積聚及組織瘢痕形成，最終引發腎小球硬化和腎小管間質纖維化，導致腎功能進行性衰竭^[5][6]。

圖1 經典TGF-β-腎臟纖維化信號通路^[4]

1. 細胞培養：

   將HK-2細胞用含10%胎牛血清、100 U/mL青霉素、100 μg/mL鏈霉素的DMEM/F12 (1:1) 完全培養基，于37℃、5% CO? 細胞培養箱中培養。

2. 每隔 2-3天換新鮮培養基一次。

3. TGF-β1處理：

   HK-2細胞匯合度至80%，添加10 ng/mL TGF-β1重組蛋白（Cat.No.:CA59, 近岸蛋白），孵育48小時。

4. 細胞收集與鑒定：

   收集細胞，進行相關標志物鑒定。

   結果鑒定-上皮間質轉化 (EMT) 的特征：

   上皮細胞標志物（如cytokeratins和E-cadherin）缺失。

   間充質細胞標志物（如N-cadherin、vimentin和纖連蛋白）的表達上調。