愛思益普專注于基于靶點的先導化合物篩選和優化，批量構建了新藥篩選的靶點和篩選技術，致力于以高效、專業的服務，幫助新藥研發企業快速有效地推進新藥研發項目。在POLθ項目中我們構建了三種不同的生化方法分別用于POL θ-N ATPase抑制劑的篩選和POL θ-C polymerase抑制劑篩選，同時愛思益普可提供相關蛋白產品。
1.POL θ-N ATPase抑制劑篩選_ADP-Glo assay
2.POL θ-C polymerase抑制劑篩選_ PicoGreen方法
在此方法中，我們合成了Template和Primer，以dNTP為原料，利用POL θ-C polymerase活性合成dsDNA，用PicoGreen試劑測定化合物對POL θ-C活性的抑制能力。
3.POL θ-C polymerase抑制劑篩選_TR-FRET 方法
PicoGreen可以測定化合物對POL θ-C抑制率，但是該方法是利用PicoGreen試劑來檢測dsDNA的合成，一方面Template和Primer本身就可形成dsDNA雙鏈，本底高，窗口小，耗時長，對于操作要求高。其次PicoGreen試劑讀取的是熒光強度，會受到反應體系來源熒光的干擾;最后，PicoGreen方法在dNTP類似物的抑制劑篩選過程中并不能區分具體的(dATP , dCTP, dGTP, dTTP) 類似物類型。
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