DEAH-box helicase 9 (DHX9)是 DEAH-box RNA 解旋酶家族的重要成員。作為一種 ATP 依賴性 RNA 解旋酶,DHX9 可解旋 RNA 或 DNA 雙鏈體,以及 DNA:RNA 雜交體 (R-loops),使其成為 DNA 復制和轉錄的重要蛋白質。DHX9 與多種細胞過程有關,包括轉錄、翻譯、mRNA 衰變和 RNA 轉運.此外,DHX9已成為腫瘤發生的重要參與者感染和自身免疫性疾病。
人DHX9基因位于染色體1q25上的前列腺癌易感位點,假基因DHX9P定位于染色體13q22。該活性基因由29個外顯子組成,編碼1270個氨基酸,蛋白大小為140 kDa(見圖1)。DHX9包含一個由8個基序組成的解旋酶核心結構域。核心區域為兩個RecA樣結構域,基序I-III位于結構域1中,基序IV-VI位于結構域2中。DHX9 N末端包含2個雙鏈RNA結合結構域(dsRBD)。最小反式激活結構域(MTAD)是RNA聚合酶 II (PolII) 相互作用的位點。解旋酶相關結構域2(HA2)位于解旋酶核心結構域的C末端附近。在DHX9的C末端有一個寡核苷酸/寡糖結合折疊(OB-fold),重疊的核定位/輸出信號,以及一個能夠結合單鏈核酸的富含甘氨酸的RGG盒。
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產品及服務
1.人DHX9 重組蛋白
2.DHX9 抑制劑篩選:兩種方法可選擇,ADP-Glo 和 Unwinding 實驗。
實驗原理
DHX9 ADP-Glo實驗原理見圖2, DHX9解螺旋需要消耗ATP,ATP轉化成ADP,使用試劑盒檢測ADP的生成量來反應DHX9的酶活性,加入試劑盒中的第一個試劑可以將實驗中未反應的ATP消耗掉,第二個試劑加入后會將實驗中產生的ADP轉化為ATP,并且里面含有熒光素酶的底物,最后使用酶標儀的化學發光模塊檢測信號值。Unwinding實驗原理見圖3,底物是由一段Cy5標記的RNA序列,BHQ2標記的DNA序列,同時與RNA互補鏈進行退火得到的。正常情況下Cy5和BHQ2相互靠近Cy5的熒光可以被BHQ2淬滅掉;當加入DHX9后,開始進行解鏈,Cy5標記的一段被解鏈后遠離BHQ2,其熒光可在酶標儀Ex/Em:620/685nm處被檢測到。
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數據展示
1.DHX9 蛋白表達
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1.DHX9 ADP-Glo 實驗
DHX9 protein(150-1150)
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