猴痘病毒的傳播途徑主要包括直接接觸感染動物的病變滲出物、血液、其它體液，或被感染動物咬傷、抓傷而感染。人與人之間主要通過密切接觸傳播，但也可以通過飛沫傳播，以及接觸被病毒污染的物品等方式進(jìn)行傳播。近期有報(bào)道指出，猴痘出現(xiàn)了新的變異毒株，這種Ib型變異病毒可以通過分泌物（如呼吸道飛沫）、皮疹或受污染物品等方式進(jìn)行傳播，且青少年兒童是易感人群，需要高度警惕。
近岸蛋白提供猴痘病毒A5L、A29L、A30L、A35R、B6R、E8L、H3L、M1R重組抗原、抗體、酶和試劑解決方案，用于疾病診斷和疫苗藥物研發(fā)。
一、猴痘病毒抗原抗體和試劑解決方案
部分抗體性能展示
驗(yàn)證方法：乳膠法
抗體配對：DA131包被，DA130標(biāo)記
驗(yàn)證結(jié)果：近岸MPXV A29L抗體對檢測A29L抗原（Cat#DRA207）的靈敏度可達(dá)100pg/mL。
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二、猴痘病毒核酸檢測原料酶及預(yù)混液
猴痘是一種由猴痘病毒引起的病毒性人畜共患病，其病原體猴痘病毒是一種有包膜的雙鏈DNA病毒。該病的癥狀類似于天花，包括發(fā)熱、頭痛、肌肉疼痛、淋巴結(jié)腫大和皮疹。猴痘病毒的檢測可通過病毒分離培養(yǎng)技術(shù)，也可通過電子顯微鏡觀察、痘病毒抗原的免疫組織化學(xué)染色、抗正痘病毒IgM和IgG的血清研究進(jìn)行檢測。然而，基于病毒流行病學(xué)特點(diǎn)和監(jiān)測需求，猴痘病毒感染的確診更適合通過PCR方法特異性地快速檢測猴痘病毒DNA。診斷標(biāo)本直接取自皮疹——皮膚、液體或痂皮等。可在短時(shí)間內(nèi)對痘病毒做出快速、特異性的早期篩查診斷。近岸蛋白針對DNA病原檢測提供高性能檢測預(yù)混液及全套原料酶，并且系列可凍干原料酶、預(yù)混液、凍干工藝，支持凍干型核酸檢測試劑盒快速開發(fā)。
產(chǎn)品性能
快速直擴(kuò)型qPCR預(yù)混液（Cat# E279） NovoStart® Blood Direct Fast Probe qPCR SuperMix (UDG)
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快速：能夠支持快速程序，即在30min內(nèi)完成反應(yīng)；
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直擴(kuò)：本品具有很強(qiáng)的抑制物耐受性，可用于抗凝全血、血漿、血清、尿液、咽拭子、唾液等樣品的DNA直接擴(kuò)增檢測；
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方便：PCR反應(yīng)所必需試劑集于一管之中，數(shù)分鐘即可完成反應(yīng)體系配制；
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防污染：dUTP-UDG系統(tǒng)有效防止PCR產(chǎn)物污染造成的假陽性。
三、猴痘病毒RNA疫苗研發(fā)產(chǎn)品及服務(wù)
RNA技術(shù)，憑借其體外快速合成、針對靶點(diǎn)的高度靈活性設(shè)計(jì)以及不干擾細(xì)胞基因組的獨(dú)特優(yōu)勢，已廣泛應(yīng)用于預(yù)防性疫苗和治療性疫苗開發(fā)中，顯著縮短了從研發(fā)到應(yīng)用的周期。近岸蛋白擁有成熟的RNA疫苗設(shè)計(jì)與開發(fā)平臺，可提供從猴痘抗原篩選、RNA序列設(shè)計(jì)、模板質(zhì)粒制備、RNA原液生產(chǎn)、LNP包封到免疫原性評價(jià)的全流程服務(wù)。
近岸蛋白猴痘RNA疫苗開發(fā)相關(guān)案例
1 體外候選分子表征
猴痘病毒抗原有兩種主要病毒形態(tài)：包膜病毒（EV）和成熟病毒（MV）。M1、B6、A35蛋白在病毒的組裝和感染等過程起著非常重要的作用。其中A35R蛋白在病毒的結(jié)構(gòu)和功能中具有一定作用，B6R蛋白參與病毒的免疫調(diào)節(jié)和感染過程，M1蛋白參與病毒粒子的組裝。近岸蛋白以猴痘病毒（MPXV）的A35R、B6R、M1R為靶標(biāo)，通過不同的截短體和連接方式來開發(fā)mRNA疫苗。各候選分子在體外均獲得良好表達(dá)。
Fig. 1 mRNA design and protein expression in transfected 293T cells.
(A) mRNA design. MPXV A35R, B6R and M1R sequences were codon-optimized and inserted into the region between 5’UTR and 3’UTR. m:different truncations or fusions ; &: multivalent mixed samples.
(B-D) protein expression measured by western blotting. The four mRNAs (1-4) were mixed separately, then was mass-equally transfected into 293T cells . Cell lysates were loaded into SDS-PAGE gels for western blot analysis after 24 hours of transfection. B: anti-A35R antibody incubation; C: anti-B6R antibody incubation; D: anti-M1R antibody incubation. M: protein marker; group number; m: mRNA; L: LNP
2 動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示
利用ELISA檢測小鼠血清對MPXV抗原(A35R、B6R和M1R)的結(jié)合抗體反應(yīng)。結(jié)果表明，在所有接種小鼠血清中均檢測到針對所有三種靶抗原的抗體，且抗體滴度隨著免疫次數(shù)的增加而顯著增加，不同組別抗體水平相當(dāng)。初步評估結(jié)果表明近岸蛋白所構(gòu)建的多組別分子有潛力開發(fā)成為新一代猴痘mRNA疫苗。
Fig. 2 Humoral Immune Response in mRNA-LNP (1-4)Vaccinated Mice.
(A) Schematic diagram of immunization, sample collection.Female BALB/c mice were intramuscular immunized with 10 μg mRNA-LNP vaccine on day 0 and day 14 (n = 4). Mice vaccinated with buffer were used as negative control. Serum was collected 0 day(before the initial vaccination), 14 and 28 days after the initial vaccination.
(B-D) The MPXV-specific antigen A35R, B6R and M1R IgG antibody titer was determined by ELISA. ("*" indicates comparison with the control Buffer of the same time period, and the horizontal line indicates pairwise comparisons. *p < 0.05; **p < 0.01)
近岸蛋白已儲備性開發(fā)多類型疫苗創(chuàng)新型候選分子，重點(diǎn)布局RNA疫苗、重組亞單位、類病毒粒子（VLP），致力于為下游疫苗企業(yè)客戶加快疫苗開發(fā)速度、快速進(jìn)入申報(bào)階段。
綜上，近岸蛋白提供猴痘病毒優(yōu)質(zhì)重組抗原、抗體、酶及試劑等產(chǎn)品和疫苗研發(fā)全流程解決方案，用于疾病診斷和疫苗藥物研發(fā)，歡迎申請?jiān)囉谩ｋ娫挘?00-600-0940。