T細胞活化是適應性免疫應答的核心環節，其激活依賴于三個關鍵信號：T細胞受體（TCR）對抗原的識別、共刺激信號以及細胞因子信號。與這一經典機制不同，CAR-T細胞的活化融合了天然T細胞的核心原理與人工設計的嵌合抗原受體（CAR）結構特性，使其能夠繞過傳統的TCR–MHC限制，直接識別腫瘤表面抗原并高效殺傷腫瘤細胞。通過CAR的合理設計，僅依靠其胞外域與表位的識別與結合，即可實現CAR-T細胞的完全活化。
當CAR特異性識別腫瘤相關表面抗原（Tumor-associated surface antigens, TAA）后，可啟動T細胞活化程序，促進其增殖與分化，進而執行關鍵效應功能。這些功能包括釋放顆粒酶（Granzyme B）和穿孔素（Perforin），直接誘導腫瘤細胞凋亡；同時分泌干擾素-γ（IFN-γ）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）等細胞因子，進一步招募其他免疫細胞并重塑腫瘤微環境。
Source: Front Immunol.
在CAR-T細胞的研發與轉化過程中，對其功能特性的評估至關重要，且標準化需求日益凸顯。目前，此類評估通常依賴于將CAR-T細胞與表達目標抗原的細胞系共培養，進而檢測其效應功能。然而，傳統腫瘤細胞系存在明顯的局限性：其在處理與培養過程中易出現活力下降、代謝狀態改變或基因突變等問題，影響實驗結果的重復性與可靠性。
為克服上述挑戰，ACROBiosystems百普賽斯依托高質量抗原靶點蛋白開發平臺、磁珠技術平臺及細胞功能分析平臺，面向細胞功能研究與應用場景，成功開發出細胞級別靶點蛋白和靶點特異性激活磁珠系列，覆蓋CD19、BCMA、CD22、Her2等多個熱門靶點，可有效誘導CAR-T細胞的特異性活化。CAR-T活化可以通過CD69和CD137表達上調進行檢測，活化后的CAR-T細胞能夠激發包括細胞毒性活性和細胞因子釋放在內的多種效應功能，其反應模式與傳統腫瘤細胞系所觸發的結果高度相似，為CAR-T細胞的功能表征提供了一個穩定、可控的標準化檢測平臺。
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為評估不同刺激形式對CAR-T細胞活化的影響，我們以CD19靶點為例，分別采用CD19 蛋白（Cat. NO. CD9-H5251）和CD19磁珠（Cat. NO. MBS-C002）對CD19 CAR-T細胞進行24小時與48小時的刺激。隨后分別收集細胞及上清液，通過流式細胞術檢測關鍵生物標志物的表達情況及細胞因子分泌水平。實驗結果顯示，細胞級別CD19 蛋白與CD19磁珠均能有效激活CAR-T細胞，誘導其執行效應功能；但在相同蛋白量條件下，CD19磁珠表現出更強的激活能力。
實驗設計
注：為比較偶聯于磁珠的CD19蛋白（Cart. MBS-C002）與非偶聯的游離形式CD19蛋白（Cat. CD9-H5251）對CAR-T細胞的刺激效果，本實驗基于磁珠上偶聯的CD19蛋白量，加入了等量的游離CD19蛋白作為對照。
CAR-T激活效果
CD19蛋白與CD19 磁珠均能刺激激活CAR-T細胞表達CD69和CD137。然而，在等量蛋白濃度下，CD19磁珠的激活效果更強。與此一致的是，經CD19磁珠刺激的CAR-T細胞也表現出更高水平的LAG-3和PD-1。
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Activation Marker
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Exhaustive Marker
細胞因子與毒性分子表達
CD19蛋白與CD19磁珠均能模擬傳統腫瘤細胞，成功誘導CD19 CAR-T細胞產生多種效應功能，包括細胞因子分泌和細胞毒性分子的表達。與上述表型活化結果一致，在等效蛋白劑量下，CD19磁珠的激活能力顯著更強，所誘導的細胞因子與細胞毒性分子水平也更高。
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Cytokines
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Cytotoxic Molecules
為進一步評估磁珠物理性質對CAR-T細胞激活的影響，我們比較了CD19磁珠（Cat. NO. MBC-C002）與CD19非磁性微珠（Cat. NO. MBS-C034）在相同實驗條件下的激活效能。結果顯示，兩者均能有效激活CAR-T細胞，但其動力學存在差異：在24小時的短期刺激中，磁性微珠展現出更強的激活能力；然而，當刺激時間延長至48小時，兩種微珠的激活效果則趨于相當。
實驗設計
CAR-T激活效果
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Activation Marker
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Exhaustive Marker
細胞因子與毒性分子表達
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Cytokines
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Cytotoxic Molecules
以上數據表明，我們的細胞級別靶點蛋白及磁珠/非磁性珠均可以特異性激活CAR-T細胞的基本效應功能。該系列產品為建立從早期研發到臨床轉化的全流程CAR-T細胞功能評估標準化體系，提供了關鍵工具。
ACROBiosystems百普賽斯致力于為細胞治療等領域提供高度個性化的研發解決方案。依托ActiveMax®技術平臺，我們可為您提供專業的定制化偶聯磁珠服務，精準匹配您獨特的研究需求。我們的定制服務支持開發多重抗原聯用磁珠，或攜帶特定點突變抗原的磁珠，以有效應對復雜的CAR設計驗證及腫瘤抗原逃逸等挑戰。此外，我們同樣提供GMP級別的定制磁珠產品，全面助力您的藥物從早期研發到臨床申報的全流程。
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Jogalekar MP, Rajendran RL, Khan F, Dmello C, Gangadaran P, Ahn BC. CAR T-Cell-Based gene therapy for cancers: new perspectives, challenges, and clinical developments. Front Immunol.
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