促紅細胞生成素（Erythropoietin，EPO）是一種在腎臟中主要產生的具有進化保守性的激素，EPO屬于第一類細胞因子超家族，由165個氨基酸形成四個α螺旋結構（圖1）。

圖1 人EPO的一級結構及其氨基酸序列

mRNA藥物作為一種新型的治療手段，在疫苗、蛋白替代治療，癌癥免疫治療，免疫細胞工程等方面具有廣闊的應用前景，脂質體納米粒（LNPs）作為修飾mRNA的主要遞送工具，其遞送效率直接影響mRNA藥物的藥效。

為評估LNPs的體外遞送效率和mRNA藥效，研究人員使用裝載不同含量的修飾hEPO-mRNA的LNPs轉染Huh7細胞，基于EPO是分泌蛋白，可以從細胞中分泌出來，因此，可在指定的時間點收集細胞上清，并使用ELISA來測定hEPO的表達，研究結果顯示，在體外研究中，Huh7細胞以劑量依賴和時間依賴的方式能有效表達hEPO（圖2）。

圖2 iLP171/mRNA介導的體外蛋白質表達

同時，為評估LNPs的體內遞送效率和mRNA藥效，將裝載修飾hEPO-mRNA的不同類型LNPs注射到小鼠體內，經過一段時間后，研究人員用ELISA方法檢測小鼠血清中hEPO含量，來評估LNPs的體內遞送效率和mRNA的藥效（圖3）。

圖3 分泌蛋白的mRNA遞送方案

綜上，通過ELISA技術檢測細胞上清、血清中hEPO的含量，可有效地評估以脂質納米粒子（LNPs）為基礎的修飾mRNA的藥理和藥效相關研究。

ClinMax? Human Erythropoietin (EPO) ELISA Kit, PRO

（Cat. No. CEA-C027）

For each experiment, each ELISA plate needs to set the standard curve. The minimum detectable concentration of EPO is less than 0.67 mIU/mL.

為評估CEA-C027和競品R兩個產品的精密度，測試了不同濃度的加標樣本，每個濃度重復測試10次，可接受范圍：CV< 10%。結果顯示，所有樣本的CV值都低于6%，優于接受范圍。

為評估CEA-C027和競品R的稀釋線性，對高值的加標樣本（血清和EDTA血漿）梯度稀釋后進行分析。結果顯示，所有分析樣本的平均回收率在90%-120%之間，在接受范圍之內。

為評估CEA-C027和競品R的回收率，對低值（加標量接近LLOQ）的加標樣本（血清和EDTA血漿）進行分析。結果顯示，血清和EDTA血漿樣本的平均回收率在80%和110%之間。

為了評估溶血對血清樣本分析的影響，測試了2%血紅蛋白的溶血模擬血清樣本。結果顯示，使用CEA-C027檢測的分析物回收率在90%-110%之間，并沒有受到溶血基質的影響，而溶血基質可能會影響競品R的EPO檢測。

為了評估高脂對血清樣本分析的影響，測試了3%甘油三酯的高脂模擬血清樣本。結果顯示，所有分析物回收率都在80%-120%之間，兩個試劑盒都沒有受到高脂基質的影響。

為了評估CEA-C027和競品R的分析一致性，兩個產品同時測試了40個健康人樣本和14個病人樣本。結果顯示，兩個產品檢測結果的一致性高，R²>0.95。