對于ADC研發人來說，內吞作用是ADC發揮療效的核心機制——只有抗體成功識別腫瘤抗原并介導藥物內化進入細胞，細胞毒性載荷才能精準釋放，實現“靶向殺傷”。因此，內吞檢測不僅是候選抗體篩選的關鍵關口，更是優化藥物結構、保障臨床療效的核心環節。
但實際研發中，不少人都經歷內吞檢測痛點：背景信號干擾強、檢測步驟繁瑣耗時、試劑影響抗原結合活性……這些問題不僅導致檢測結果不準，更拖慢了候選藥物的篩選節奏！
ACROBiosystems百普賽斯針對性推出pH敏感型內吞檢測試劑（Cat. No.IGG-PZF2001），以創新設計打破檢測困境，用極簡流程實現高效精準檢測，讓候選藥物篩選效率直接翻倍！
無需復雜預處理，最快10分鐘即可完成標記：
1. 標記抗體：將ADC內吞檢測試劑與待檢測抗體/ADC在室溫下共孵育10min形成標記復合物，無需對抗體進行額外標記，直接簡化前期準備工作；
2. 孵育：將靶細胞與標記復合物在 37℃條件下孵育2小時（點擊查看實驗條件優化方案）。試劑采用pH敏感熒光染料標記Fab片段，僅特異性結合待測抗體的Fc部分，不占用抗原結合位點，同時僅在細胞內酸性環境中激活熒光信號，胞外中性環境下幾乎無信號干擾；
3. 結果分析：清洗后通過流式細胞術（FACS）定量分析內吞效率，無需繁瑣步驟，直接讀取清晰結果。
抗體內化檢測試劑原理圖
本試劑已通過嚴格的實驗驗證，數據表現亮眼：
-
流式分析驗證
在SK-BR-3細胞+抗HER2抗體、Raji細胞+抗CD20抗體的實驗中，此ADC內吞檢測試劑能清晰區分特異性內吞信號與同型對照信號，陽性檢出率顯著高于對照組。
圖1 抗體內吞作用的流式細胞術（FACS）分析：A. HER2 陽性細胞系中 HER2 特異性抗體曲妥珠單抗（紅色）的檢測結果B. CD20 陽性細胞系中 CD20 特異性抗體利妥昔單抗（紅色）的檢測結果。藍色：IgG1 同型對照抗體的檢測結果
-
內吞檢測試劑濃度優化
為確定最佳工作濃度，我們在 CD20 陽性和 HER2 陽性細胞系中對該內吞作用檢測試劑進行了系統性評估：將一抗濃度固定為 2 µg/mL后，通過綜合的信噪比分析，我們發現在這兩種細胞系中，1: 2 的比例（即 1 µg/mL檢測試劑與 2 µg/mL抗體搭配）能夠在檢測靈敏度與背景信號抑制之間實現最佳平衡（圖 2 A-D）。這一優化后的條件為后續的內吞作用檢測實驗建立了一套可靠且經濟高效的實驗方案供您參考。
圖2 不同檢測試劑濃度下抗體內吞作用的流式細胞術（FACS）分析。A. CD20 陽性細胞系中的檢測試劑對照組；B. CD20 陽性細胞系中檢測試劑與 CD20 特異性抗體利妥昔單抗（Rituximab）共孵育組；空白組（Blank）：僅含細胞；紅色（Red）：1 μg/mL檢測試劑；藍色（Blue）：2 μg/mL檢測試劑；紫色（Purple）：4 μg/mL檢測試劑；C. HER2 陽性細胞系中的檢測試劑對照組；D. HER2 陽性細胞系中檢測試劑與 HER2 特異性抗體曲妥珠單抗（Trastuzumab）共孵育組；空白組（Blank）：僅含細胞；紅色（Red）：1 μg/mL檢測試劑；藍色（Blue）：2 μg/mL檢測試劑；綠色（Green）：4 μg/mL檢測試劑
此外，該內吞檢測試劑也支持細胞成像方法驗證：與溶酶體標記探針共定位顯示，試劑能精準追蹤抗體內吞后的胞內轉運路徑，熒光信號清晰可辨，為內吞機制研究提供直觀證據。
圖3 A. 內吞作用檢測試劑（貨號：IGG-PZF2001）B. IgG1 同型對照抗體 - 內吞作用檢測試劑偶聯物C. 抗 HER2 抗體 - 內吞作用檢測試劑偶聯物D. 抗 HER2 抗體 - 內吞作用檢測試劑偶聯物（Z 軸堆疊掃描成像）
核心優勢，精準解決研發痛點
> 高信噪比+低背景干擾：pH敏感特性讓熒光信號僅在細胞內激活，有效規避胞外背景干擾，陽性信號強、分辨率高，輕松區分不同內吞水平的候選藥物，檢測結果更可靠；
> 不影響抗原結合活性：試劑靶向結合抗體Fc端，避開抗原結合位點，完美保留抗體與腫瘤抗原的結合能力，確保檢測結果真實反映抗體本身的內吞活性；
> 操作極速便捷：僅需10分鐘即可形成穩定的標記復合物，后續孵育、檢測流程簡單，大幅節省實驗時間；
> 兼容性拉滿+適配全階段：適配貼壁細胞、懸浮細胞等多種細胞模型，同時支持流式定量分析與細胞成像定性觀察，既能滿足抗體發現階段的高通量篩選，也能用于藥物優化、臨床前開發及作用機制研究；
作為ADC研發的核心支撐工具，內吞檢測的準確性與效率直接影響項目推進節奏。ACROBiosystems百普賽斯的ADC內吞檢測試劑，以“精準、便捷、高效”的核心優勢，已成為眾多藥企和科研機構的優選工具，助力您快速鎖定高活性候選分子。
相關閱讀：【技術分享】HER2/CD20抗體內吞靈敏度探究與參數優化
ACROBiosystems
inquiry@acrobiosystems.com
15117918562
（備注：姓名+公司）