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qPCR一文解讀

作者:蘇州近岸蛋白質科技股份有限公司 2024-11-14T00:00 (訪問量:28558)

qPCR原理

在 PCR 反應體系中加入熒光基團,這些熒光基團產生熒光信號,通過對熒光信號的實時監測,可以實現對起始模板DNA數量的定量分析。

                                                圖1 qPCR原理示意圖

 

原理聽起來超簡單,但是操作起來真的令人頭大,簡單的實驗卻得不到理想結果,這太容易質疑自己了!以下的意外情況你中了幾條?

  1. 無擴增信號或擴增效率低;

  2. 非特異性擴增;

  3. 結果重復性差;

    ……

 

一款預混+快速程序的qPCR試劑

NovoStart® Universal Fast SYBR qPCR SuperMix(目錄號:E401),助你順利拿到完美實驗結果!

亮點

 定向優化擴增酶性能,在原有技術的基礎上顯著縮短儀器程序擴增時間,40個循環,時間節省50%以上!

 兼具高靈敏度、高特異性的特點,使qPCR實驗更絲滑高效!

 預混通用ROX,可適配所有儀器類型!

 試劑穩定,在37℃可以存放14天!

 

性能展示
01 擴增性能測試

模板:100ng/10ng/1ng/100pg 293T細胞RNA反轉的cDNA,10倍梯度稀釋

圖3 E401對不同濃度模版的擴增性能測試

 

結果表明:Novoprotein快速Universal qPCR Mix(目錄號:E401),擴增效率高,重復性好。

 

02 實驗程序對比

 

03 靈敏度比對

模板:100ng/10ng/1ng/100pg K562細胞總RNA反轉的cDNA,10倍梯度稀釋

 

1:品牌A   

2:Novoprotein

 1. 品牌B

 2:Novoprotein

圖4 E401與其他品牌同類產品的擴增曲線比對

 

結果表明:Novoprotein快速Universal qPCR Mix比其他品牌同類產品靈敏度及擴增效率更高。

 

04 儀器適配性能

模板:100ng/10ng/1ng/100pg 293T細胞RNA反轉的cDNA,10倍梯度稀釋

圖5 品牌X和近岸蛋白E401對不同機型檢測的適配性測試

結果表明:Novoprotein快速Universal qPCR Mix于不同濃度ROX的儀器,都有較好的兼容性。

 

05 穩定性強

模板:100ng/10ng/1ng/100pg K562細胞總RNA反轉的cDNA,10倍梯度稀釋

 

圖6 E401 37℃條件下放置14天,與-20℃條件下存儲的試劑進行對比

 

結果表明:Novoprotein快速Universal qPCR Mix在37℃放置14天,與-20℃存儲的試劑進行對比,性能無明顯差異(紅色線條為-20℃,藍色為37℃ )。

 

產品信息

貨號

產品名稱

規格

規格

E401-01A

NovoStart® Universal Fast SYBR qPCR SuperMix

1ml×5

快速預混ROX

qPCR MIX

 

E401-01B

1ml×25

 

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