
抗原特異性T細胞的活化,是適應性免疫應答的核心環節。這一過程始于主要組織相容性復合體(Major histocompatibility complex,MHC)通過非共價相互作用與肽抗原結合,在抗原呈遞細胞(Antigen presenting cell,APC)表面形成pMHC復合物,這些復合物可在次級淋巴組織或炎癥局部被特異性T細胞群體識別。
T細胞的激活與功能發揮依賴于兩個關鍵信號的協同作用:第一信號來源于T細胞受體(TCR)/CD3復合物識別APC表面的pMHC復合物。這一步驟確保了T細胞能夠特異性地識別外來抗原或自身異??乖?。第二信號則來自協同刺激分子間的相互作用,如CD28/B7、LFA-1/ICAM-1等。這些分子的結合為T細胞提供了額外的活化信號,確保T細胞在識別抗原的同時,也獲得了足夠的刺激以啟動其活化程序。

T細胞活化信號(Source:Nat Rev Immunol.)
在上述激活路徑中,多肽與MHC分子之間的親和力是成功啟動免疫應答的首要決定因素。MHC分子如同一個“展示平臺”,只有那些與之具有足夠高親和力的多肽才能被穩定地結合并呈遞到細胞表面,從而形成pMHC復合物。因此,篩選能夠與特定MHC分子(如HLA-A*02:01)高親和力結合的多肽,已成為開發新型疫苗、免疫療法及診斷工具的核心環節與關鍵步驟。
盡管基于多肽置換生成pMHC復合物是一項成熟技術,但其在置換效率的精準監控、操作通量以及復合物的穩定性方面仍面臨顯著瓶頸。為此,ACROBiosystems百普賽斯基于肽交換原理,開發了HLA-A*02:01多肽篩選ELISA試劑盒(Cat. No. HEP-0201),為高效篩選肽段與MHC單體的結合能力提供了創新解決方案。
該檢測方法將目標肽段、特有的肽置換因子及含有特殊退出肽的MHC I類單體(HLA-A*02:01)共同孵育。該策略能高效驅動交換反應,隨后通過ELISA實驗可在96孔板中對肽交換效率進行精確定量。該方法用途廣泛,覆蓋了從MHC結合肽初篩、親和力評估和抗原表位鑒定等一系列關鍵應用,是新藥研發的重要工具。

HLA-A*02:01多肽篩選ELISA試劑盒檢測原理
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高通量定量篩選:基于96孔板,6小時快速、定量篩選目標肽;
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高檢測靈敏度: 參考肽IC50值為6.237 μM;
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卓越的數據一致性:預測值與實測值符合率高達88%。
參考肽與生物素化MHC I 類單體的交換實驗
??靈敏度驗證:IC50達6.237 μM
使用HLA-A*02:01多肽篩選ELISA試劑盒(Cat. No. HEP-0201),將HLA-A*02:01 參考肽 (Cat. No. HEP-0201-C04) 進行系列稀釋(1:3 倍比稀釋,濃度范圍從 200μM 至 0.05 μM),然后與生物素化MHC I類單體 (HLA-A*02:01) (Cat. No. HEP-0201-C02) 混合。在該夾心ELISA檢測中,其半數抑制濃度(IC50)為 6.237 μM。通常,在200 μM濃度下,其肽交換率可達 93.1%。(此數據經過質量控制測試驗證)

??預測與實測高度一致:IC50值符合率高達88%
在所測試的多肽中,預測與實測的IC50值顯示出高度一致性,符合率高達88%(42條中有37條與預測數據相符)。

MHC-多肽復合物產品及開發服務
為滿足客戶多樣化需求,ACROBiosystems百普賽斯依托成熟的蛋白天然結構設計平臺和真核蛋白表達技術平臺,開發出一系列經流式細胞驗證的高生物活性天然結構MHC-復合物,并且可提供定制開發服務,覆蓋單體、四聚體以及多種熒光標記類型,可根據具體需求個性化定制。



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