ADC在體外表現好,不代表在體內有效。愛思益普建立了從細胞到動物的完整驗證體系,確保數據可靠。
細胞水平評價包括多個維度:靶抗原結合驗證(流式細胞術)、內吞效率測定(共聚焦顯微鏡)、細胞殺傷實驗(CellTiter-Glo)、旁觀者效應評估(共培養體系)。平臺還開發了溶酶體降解驗證實驗,通過抑制劑(如氯喹)阻斷溶酶體功能,確認ADC的殺傷依賴溶酶體途徑。
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體內藥效評價采用多種腫瘤模型:CDX模型(人源腫瘤細胞系接種免疫缺陷小鼠)和PDX模型(患者腫瘤組織直接接種)。PDX模型保留了患者腫瘤的異質性,臨床預測價值更高。
平臺通過生物發光成像(BLI)技術,實時監測腫瘤生長。給小鼠注射熒光素底物,腫瘤細胞表達的熒光素酶催化發光,信號強度與腫瘤大小成正比。這樣可以在不犧牲動物的情況下,長期觀察藥效。
藥代動力學(PK)研究是另一關鍵環節。平臺采用LC-MS/MS技術,同時檢測血液中的總抗體、結合型payload、游離型payload,繪制藥物濃度-時間曲線,計算半衰期、清除率等參數。
在某項目中,平臺發現ADC的腫瘤穿透性不足,導致中心區域細胞殺傷不完全。通過調整抗體分子量(使用Fab片段替代完整抗體),改善了組織穿透性,腫瘤抑制率從60%提升到85%。
