肝細胞癌（HCC）是一種預后不良的異質性極強的惡性腫瘤，標準治療策略僅對有限亞型的患者有效。因此迫切需要針對晚期HCC的更有效的腫瘤易損靶向或個體化治療策略。2025年2月18日，浙江大學醫學院附屬第一醫院鄭樹森院士、宋朋紅教授團隊在Journal of Advanced Research (IF 11.4)上發表文章“Comprehensive multi-omics analyses exposes a precision therapy strategy that targets replication stress in hepatocellular carcinoma using WEE1 inhibition”，發現腫瘤復制應激（RS）水平可以作為HCC的預后指標，并指導基于風險-收益分析的藥物治療方案，為精準治療提供有價值的見解。

作者分別對178例和94例未經治療的原發性HCC臨床樣本進行了蛋白質組學和轉錄組學測序，發現以超增殖為特征的亞型表現出最差的預后和最高的RS水平，表明RS是HCC的獨特特征和極有希望的治療靶點，并通過藥物篩選確定奧沙利鉑是治療HCC的RS靶向療法。激酶是有吸引力的藥物靶點，作者采用靶向激酶組的慢病毒CRISPR敲除文庫，系統地識別了奧沙利鉑治療的敏感協同靶點，發現WEE1是奧沙利鉑治療后Huh7細胞中最顯著的合成致死基因。Western blots和IHC染色顯示，與鄰近的非腫瘤組織相比，HCC腫瘤中WEE1的表達更高，TCGA數據庫顯示，較高水平的WEE1或CDK1表達與較差的生存結果相關。此外，RS最高的HCC亞組S-III與其余兩個亞組相比，WEE1和CDK1 mRNA表達最高，上述結果表明在HCC中靶向WEE1可能是對抗RS的一種有希望的方法。

圖1 WEE1是奧沙利鉑在HCC中的合成致死基因

WEE1抑制劑adavosertib目前處于多個II期臨床試驗中，作者發現奧沙利鉑和adavosertib在體外和體內協同抑制HCC惡性表型。GSEA顯示，在adavosertib或奧沙利鉑治療后，DDR相關基因顯著富集，彗星尾試驗進一步驗證了這一結果。更重要的是，與單藥治療相比，聯合治療顯著提高了彗星尾、γH2AX病灶和DNA損傷相關蛋白表達水平。這證實了adavosertib和奧沙利鉑的協同聯合導致HCC細胞雙鏈斷裂和復制叉崩潰的增加。RNA-seq數據顯示，大多數DNA損傷修復相關基因在奧沙利鉑治療后被激活，而在adavosertib治療后被抑制。作者進一步探討adavosertib增強DNA損傷的潛在機制，發現adavosertib降低了HR介導的SNU449和Huh7細胞DNA雙鏈斷裂修復效率，奧沙利鉑和adavosertib聯合治療導致HCC細胞有絲分裂過早，并協同引發細胞凋亡增強。

圖2 Adavosertib抑制同源重組并增強奧沙利鉑誘導的HCC細胞DNA損傷

為了研究奧沙利鉑和Adavosertib是否在高RS癌癥中協同作用，作者構建了流體動力學注射（HDI）模型，并使用致癌質粒和睡美人（SB）轉座子質粒激活RS。發現在單藥治療、聯合治療和對照處理的HDI小鼠中，聯合治療組的標準化肝臟攝取值（SUV）明顯低于單藥組和對照組，聯合治療還伴隨著腫瘤灶數量和肝/體重比的減少。生存分析顯示，聯合組小鼠的存活時間明顯長于對照組和單藥組。索拉非尼是治療晚期HCC的一線藥物，但臨床耐藥性仍然是一個問題。作者研究了奧沙利鉑和Adavosertib聯合治療對索拉非尼耐藥HCC細胞（SNU449- SR）生長的影響，發現聯合治療顯著降低了SNU449-SR細胞的集落形成和腫瘤球形成，造成更多的DNA損傷積累，最終協同誘導細胞凋亡。這些結果表明奧沙利鉑聯合Adavosertib在高RS模型和索拉非尼耐藥模型中仍然具有較強的協同作用。

圖3 奧沙利鉑和Adavosertib的抗腫瘤協同作用

本研究在蛋白質組學和轉錄組學水平上為RS在HCC中的精確治療靶向提供了有希望的見解，發現adavosertib和奧沙利鉑可能是治療肝細胞癌的有效方法。adavosertib和奧沙利鉑聯合使用通過靶向RS在HCC中提供有效的抗腫瘤作用，能增強DNA損傷，誘導有絲分裂突變和細胞凋亡。表明腫瘤RS水平可以作為HCC的預后指標，并指導基于風險-收益分析的藥物治療方案，為精準治療提供有價值的見解。

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