PE熒光標記蛋白,打造更完善的CAR流式檢測方案-自主發布-資訊-生物在線

PE熒光標記蛋白,打造更完善的CAR流式檢測方案

作者:北京百普賽斯生物科技股份有限公司 2023-05-08T14:27 (訪問量:9837)


藻紅蛋白(PE)——更明亮、安全、穩定

藻膽蛋白(Phycobiliproteins)是海藻中最具代表性的蛋白類天然產物,主要包括藻紅蛋白、藻藍蛋白、別藻藍蛋白和藻紅藍蛋白四類,其中,R-藻紅蛋白(R-Phycoerythrin,R-PE)是應用最為廣泛的藻膽蛋白之一, 其保守、相對穩定的結構以及優良的光學性能等,使得R-PE作為熒光標記物質在免疫檢測、熒光顯微技術和流式細胞熒光測定等方面具有廣闊的應用前景。

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PE α 亞基(a) β 亞基(b)及所攜帶的色素分子的示意圖

在早之前,主要是采用傳統方法人工合成熒光素作為標記物,但熒光素的價格昂貴,且通常會產生一些有毒物質,易造成環境的污染,更重要的是在長期儲存后同蛋白的結合能力會減弱,甚至消失,并且檢測過程中存在生物本底熒光背景的干擾。相比之下,將PE用于熒光分析,具有傳統有機化學染料無法比擬的優越性:

? PE在PH 4~11之間的光譜沒有明顯變化,性質穩定;

? 斯托克斯位移大:PE的斯托克斯位移一般為80 nm,而人工合成的熒光素斯托克斯位移一般都小于30 nm;

? 藻紅蛋白的熒光強度是普通熒光素的30~100倍,熒光量子產率高達98%,熒光發射通常位于橙紅光區,這就很大程度地減少了背景熒光的干擾,檢測靈敏度高;

? PE等電點在 4.7 左右,在生理環境中通常帶負電,而細胞中的生物大分子表面一般也帶負電,在極大程度上降低了藻膽蛋白與大分子物質發生非特異性吸附的可能性;

? 純天然海藻植物提取,無毒,無放射性,操作安全。

PE熒光標記蛋白——高特異、天然活性、高穩定性

基于藻紅蛋白PE的特色優勢,可將其標記靶點蛋白后用于細胞治療藥物開發的多個場景,如使用流式檢測CAR細胞陽性率、PK 研究、通過IHC技術在組織水平下檢測CAR細胞藥物的浸潤分布情況等,是細胞治療藥物開發過程中不可或缺的重要試劑,為滿足細胞治療產品質控和臨床樣本分析更高質量標準的檢測要求,ACROBiosystems百普賽斯依托Star Staining新一代熒光定點標記技術平臺開發了一系列獨具特色的PE熒光標記CAR靶點蛋白,在保持PE熒光特色優勢的前提下,還可最大程度的維持蛋白的天然構象和活性,并保證標記產品性能的高度均一性和批間一致性。

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Star Staining新一代熒光定點標記技術示意圖

關于Star Staining

ACROBiosystems百普賽斯Star Staining新一代定點標記技術平臺開發的高質量熒光標記蛋白,可保持蛋白的天然構象,不影響蛋白活性,均一性好、批間一致性高。“星級”的研發實力,“星級”的技術平臺及產品,Star Staining專為CAR-T細胞質控和臨床樣本分析檢測而設計。

? 高活性:Star Staining PE熒光標記CD19蛋白經流式驗證可高特異檢測CD19 CAR表達

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5e5 of anti-CD19 CAR-293 cells were stained with 100 μL of 1:50 dilution (2 μL stock solution in 100 μL FACS buffer) of PE-Labeled Human CD19 (20-291), His Tag (Cat. No. CD9-HP2H5) and negative control protein respectively (Fig. C and B), and non-transfected 293 cells were used as a control (Fig. A). PE signal was used to evaluate the binding activity (QC tested).

? 極低非特異:Star Staining PE熒光標記BCMA蛋白經未轉染CAR的PBMC細胞雙染批檢驗證,無非特異背景問題,特異性顯著高于競品,保證CAR表達檢測結果的特異性和準確性,適用于CAR細胞臨床樣本分析

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Non-specific binding to non-transduced PBMCs between PE-Labeled Human BCMA Protein of ACROBiosystmes and competitor. 5e5 of non-transduced PBMCs were stained with PE -Labeled Human BCMA Protein (Cat. No. BCA-HP2H7) and anti-CD3 antibody, washed and then analyzed with FACS. FITC signal was used to evaluate the expression of CD3+ T cells in non-transduced PBMCs, and PE signal was used to evaluate the non-specific binding activity to non-transduced PBMCs.

? 高穩定性:25℃條件下加速48h和反復凍融三次,依然可保持較高的生物活性,顯示出PE標記蛋白的高度穩定性,可放心儲存和使用

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PE-Labeled Human BCMA (Cat. No. BCA-HP2H7) at 25℃ for 48 hours and freeze-throw cycles are stable

without performance reduction.

熱門PE熒光標記蛋白

CAR靶點分子 貨號 產品描述
CD19 CD9-HP2H5

PE-Labeled Human CD19 (20-291) Protein, His Tag Star Staining

BCMA BCA-HP2H7

PE-Labeled Human BCMA / TNFRSF17 Protein, His Tag Star Staining

Mesothelin MSN-HP2H8

PE-Labeled Human Mesothelin / MSLN (296-580) Protein, His Tag Star Staining

Siglec-2 SI2-HP2H5

PE-Labeled Human Siglec-2 / CD22 Protein, His Tag Star Staining

Glypican 3 GP3-HP2H9

PE-Labeled Human Glypican 3 / GPC3 Protein, His Tag Star Staining

Her2 HE2-HP2H8

PE-Labeled Human Her2 / ErbB2 Protein, His Tag Star Staining

CD7 CD7-HP2H6

PE-Labeled Human CD7 Protein, His Tag Star Staining

Siglec-3 CD3-HP2H7

PE-Labeled Human Siglec-3 / CD33 Protein, His Tag Star Staining

EGFRvIII EGI-HP2H6

PE-Labeled Human EGFRvIII Protein, His Tag Star Staining

EGF R EGR-HP2H7

PE-Labeled Human EGF R Protein, His Tag Star Staining

CD27 Ligand CDL-HP246

PE-Labeled Human CD27 Ligand / CD70 Protein, His Tag Star Staining


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