PE熒光標(biāo)記蛋白,打造更完善的CAR流式檢測(cè)方案-自主發(fā)布-資訊-生物在線

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PE熒光標(biāo)記蛋白,打造更完善的CAR流式檢測(cè)方案

作者:北京百普賽斯生物科技股份有限公司 2023-05-08T14:27 (訪問(wèn)量:10828)


藻紅蛋白(PE)——更明亮、安全、穩(wěn)定

藻膽蛋白(Phycobiliproteins)是海藻中最具代表性的蛋白類天然產(chǎn)物,主要包括藻紅蛋白、藻藍(lán)蛋白、別藻藍(lán)蛋白和藻紅藍(lán)蛋白四類,其中,R-藻紅蛋白(R-Phycoerythrin,R-PE)是應(yīng)用最為廣泛的藻膽蛋白之一, 其保守、相對(duì)穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)以及優(yōu)良的光學(xué)性能等,使得R-PE作為熒光標(biāo)記物質(zhì)在免疫檢測(cè)、熒光顯微技術(shù)和流式細(xì)胞熒光測(cè)定等方面具有廣闊的應(yīng)用前景。

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PE α 亞基(a) β 亞基(b)及所攜帶的色素分子的示意圖

在早之前,主要是采用傳統(tǒng)方法人工合成熒光素作為標(biāo)記物,但熒光素的價(jià)格昂貴,且通常會(huì)產(chǎn)生一些有毒物質(zhì),易造成環(huán)境的污染,更重要的是在長(zhǎng)期儲(chǔ)存后同蛋白的結(jié)合能力會(huì)減弱,甚至消失,并且檢測(cè)過(guò)程中存在生物本底熒光背景的干擾。相比之下,將PE用于熒光分析,具有傳統(tǒng)有機(jī)化學(xué)染料無(wú)法比擬的優(yōu)越性:

? PE在PH 4~11之間的光譜沒(méi)有明顯變化,性質(zhì)穩(wěn)定;

? 斯托克斯位移大:PE的斯托克斯位移一般為80 nm,而人工合成的熒光素斯托克斯位移一般都小于30 nm;

? 藻紅蛋白的熒光強(qiáng)度是普通熒光素的30~100倍,熒光量子產(chǎn)率高達(dá)98%,熒光發(fā)射通常位于橙紅光區(qū),這就很大程度地減少了背景熒光的干擾,檢測(cè)靈敏度高;

? PE等電點(diǎn)在 4.7 左右,在生理環(huán)境中通常帶負(fù)電,而細(xì)胞中的生物大分子表面一般也帶負(fù)電,在極大程度上降低了藻膽蛋白與大分子物質(zhì)發(fā)生非特異性吸附的可能性;

? 純天然海藻植物提取,無(wú)毒,無(wú)放射性,操作安全。

PE熒光標(biāo)記蛋白——高特異、天然活性、高穩(wěn)定性

基于藻紅蛋白PE的特色優(yōu)勢(shì),可將其標(biāo)記靶點(diǎn)蛋白后用于細(xì)胞治療藥物開(kāi)發(fā)的多個(gè)場(chǎng)景,如使用流式檢測(cè)CAR細(xì)胞陽(yáng)性率、PK 研究、通過(guò)IHC技術(shù)在組織水平下檢測(cè)CAR細(xì)胞藥物的浸潤(rùn)分布情況等,是細(xì)胞治療藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程中不可或缺的重要試劑,為滿足細(xì)胞治療產(chǎn)品質(zhì)控和臨床樣本分析更高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)要求,ACROBiosystems百普賽斯依托Star Staining新一代熒光定點(diǎn)標(biāo)記技術(shù)平臺(tái)開(kāi)發(fā)了一系列獨(dú)具特色的PE熒光標(biāo)記CAR靶點(diǎn)蛋白,在保持PE熒光特色優(yōu)勢(shì)的前提下,還可最大程度的維持蛋白的天然構(gòu)象和活性,并保證標(biāo)記產(chǎn)品性能的高度均一性和批間一致性。

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Star Staining新一代熒光定點(diǎn)標(biāo)記技術(shù)示意圖

關(guān)于Star Staining

ACROBiosystems百普賽斯Star Staining新一代定點(diǎn)標(biāo)記技術(shù)平臺(tái)開(kāi)發(fā)的高質(zhì)量熒光標(biāo)記蛋白,可保持蛋白的天然構(gòu)象,不影響蛋白活性,均一性好、批間一致性高?!靶羌?jí)”的研發(fā)實(shí)力,“星級(jí)”的技術(shù)平臺(tái)及產(chǎn)品,Star Staining專為CAR-T細(xì)胞質(zhì)控和臨床樣本分析檢測(cè)而設(shè)計(jì)。

? 高活性:Star Staining PE熒光標(biāo)記CD19蛋白經(jīng)流式驗(yàn)證可高特異檢測(cè)CD19 CAR表達(dá)

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5e5 of anti-CD19 CAR-293 cells were stained with 100 μL of 1:50 dilution (2 μL stock solution in 100 μL FACS buffer) of PE-Labeled Human CD19 (20-291), His Tag (Cat. No. CD9-HP2H5) and negative control protein respectively (Fig. C and B), and non-transfected 293 cells were used as a control (Fig. A). PE signal was used to evaluate the binding activity (QC tested).

? 極低非特異:Star Staining PE熒光標(biāo)記BCMA蛋白經(jīng)未轉(zhuǎn)染CAR的PBMC細(xì)胞雙染批檢驗(yàn)證,無(wú)非特異背景問(wèn)題,特異性顯著高于競(jìng)品,保證CAR表達(dá)檢測(cè)結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性,適用于CAR細(xì)胞臨床樣本分析

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Non-specific binding to non-transduced PBMCs between PE-Labeled Human BCMA Protein of ACROBiosystmes and competitor. 5e5 of non-transduced PBMCs were stained with PE -Labeled Human BCMA Protein (Cat. No. BCA-HP2H7) and anti-CD3 antibody, washed and then analyzed with FACS. FITC signal was used to evaluate the expression of CD3+ T cells in non-transduced PBMCs, and PE signal was used to evaluate the non-specific binding activity to non-transduced PBMCs.

? 高穩(wěn)定性:25℃條件下加速48h和反復(fù)凍融三次,依然可保持較高的生物活性,顯示出PE標(biāo)記蛋白的高度穩(wěn)定性,可放心儲(chǔ)存和使用

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PE-Labeled Human BCMA (Cat. No. BCA-HP2H7) at 25℃ for 48 hours and freeze-throw cycles are stable

without performance reduction.

熱門PE熒光標(biāo)記蛋白

CAR靶點(diǎn)分子 貨號(hào) 產(chǎn)品描述
CD19 CD9-HP2H5

PE-Labeled Human CD19 (20-291) Protein, His Tag Star Staining

BCMA BCA-HP2H7

PE-Labeled Human BCMA / TNFRSF17 Protein, His Tag Star Staining

Mesothelin MSN-HP2H8

PE-Labeled Human Mesothelin / MSLN (296-580) Protein, His Tag Star Staining

Siglec-2 SI2-HP2H5

PE-Labeled Human Siglec-2 / CD22 Protein, His Tag Star Staining

Glypican 3 GP3-HP2H9

PE-Labeled Human Glypican 3 / GPC3 Protein, His Tag Star Staining

Her2 HE2-HP2H8

PE-Labeled Human Her2 / ErbB2 Protein, His Tag Star Staining

CD7 CD7-HP2H6

PE-Labeled Human CD7 Protein, His Tag Star Staining

Siglec-3 CD3-HP2H7

PE-Labeled Human Siglec-3 / CD33 Protein, His Tag Star Staining

EGFRvIII EGI-HP2H6

PE-Labeled Human EGFRvIII Protein, His Tag Star Staining

EGF R EGR-HP2H7

PE-Labeled Human EGF R Protein, His Tag Star Staining

CD27 Ligand CDL-HP246

PE-Labeled Human CD27 Ligand / CD70 Protein, His Tag Star Staining


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