連接子和payload是ADC的"核心機密"。連接子要在血液中穩定,進入腫瘤細胞后又能快速釋放payload;payload要足夠毒,一個分子就能殺死一個癌細胞。
愛思益普的連接子篩選平臺提供多種化學策略:可裂解連接子(對pH、酶、還原劑敏感)和不可裂解連接子(依賴抗體完全降解)。平臺通過血漿穩定性測試,模擬體內環境,評估連接子的"保險"性能。
在某項目中,平臺發現傳統連接子會被血漿蛋白酶提前切斷,導致payload在到達腫瘤前泄漏。通過引入PEG修飾,增強了連接子的親水性,解決了這一問題,藥物半衰期顯著延長。
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payload篩選是平臺的技術亮點。平臺建立了20多種商業payload庫,包括微管抑制劑(如MMAE、MMAF)、DNA損傷劑(如Dxd、PBD)等。通過CellTiter-Glo細胞殺傷實驗,測定IC50值,評估payload的毒性強度。
平臺還開發了"旁觀者效應"檢測技術。ADC殺死靶抗原陽性細胞后,釋放的payload可能擴散到鄰近的靶抗原陰性細胞,擴大殺傷范圍。這一效應對實體瘤尤為重要,因為實體瘤中靶抗原表達不均勻。
通過PAMPA實驗和LogP測定,平臺定量評估payload的膜滲透性,預測其旁觀者效應潛力。在某TROP2-ADC項目中,平臺通過這一技術,選擇了膜滲透性適中的payload,既保證旁觀者效應,又避免全身毒性
