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省心、高效的circRNA合成試劑盒來了,助您領跑RNA科研前沿

作者:蘇州近岸蛋白質科技股份有限公司 2025-06-13T00:00 (訪問量:28806)

與mRNA兩端暴露不同,circRNA分子呈共價閉合環狀結構,不易被RNase降解,具有較高的穩定性,因而大大延長了其半衰期,從而達到長時效的目的。同時也是因為其結構的特殊性,較難被機體的抗原識別受體識別,因此不需要修飾核苷酸的引入降低免疫原性,從而降低了合成成本。

circRNA體外合成常見方法包括:I型內含子自剪接、Ⅱ型內含子自剪接及T4 RNA連接酶介導的酶法連接。近岸蛋白推出的Circular RNA Synthesis Kit (PIE I)(Cat.No.:E336),基于I型內含子自剪接機制,實現高效、便捷的circRNA制備。

 

試劑盒配備體外轉錄全套試劑、環化專用Buffer和LiCl純化試劑,操作流程簡單。通過體外轉錄獲得RNA前體,經環化反應,環化效率可達70%以上。

合成后的circRNA可通過RNase R(Cat. No.:E224)處理純化后,獲得更高純度的目標產物,適用于后續功能研究或體內外實驗。

 

數據展示

1 circRNA合成

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圖例)使用Circular RNA Synthesis Kit (PIE I)進行eGFP circRNA(泳道1-3)和Luciferase circRNA(泳道4-6)合成,經過環化反應后大部分Pre RNA環化成circRNA。RNase R去除線性RNA后,circRNA純度進一步提升。

 

2 circRNA表達

eGFP mRNA和circRNA在293T細胞中表達

圖片

與eGFP mRNA相比,circRNA維持高水平表達。

 

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與Luciferase mRNA相比,circRNA維持高水平表達。

 

兩款circRNA藥物相繼獲批臨床,無疑給眾多circRNA研究人員打上了一劑強心針。隨著序列設計的不斷優化,環化工藝的進一步探索,伴隨circRNA的各項技術壁壘也將會逐步打破,越來越多的研發管線滿足臨床治療需求,circRNA未來可期。

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應用場景 目錄號 名稱
質粒線性化 RE057 BspQI
RE015 XbaI
RE106 PmeI
RE107 NotI
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mRNA合成 E332 T7 High Yield RNA Transcription Kit 2.0
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M082 Cap 1 Capping System
M012 E.Coli Poly A Polymerase
E331 T7 High Yield RNA Co-Transcription Kit for Low dsRNA with CAP1 GAG
E431 T7 High Yield RNA Co-Transcription Kit for Low dsRNA with CAP1 GAG (3‘OMe)
saRNA合成 E231 T7 High Yield RNA Transcription Kit for Long Fragment with CAP1 GAG
E233 T7 High Yield RNA Transcription Kit for Long Fragment with CAP1 GAU
E341 T7 High Yield RNA Transcription Kit for Long Fragment
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circRNA純化 E224 RNase R
mRNA MR008/MR010 eGFP mRNA/eGFP mRNA (N1-Me-Pseudo UTP)
MR009/MR011 Luciferase mRNA/Firefly Luciferase mRNA (N1-Me-Pseudo UTP)
MR105 mCherry mRNA (N1-Me-Pseudo UTP)
MR204 tdTomato mRNA (N1-Me-Pseudo UTP)
MR203 Cre mRNA (N1-Me-Pseudo UTP)
MR015 OVA mRNA (N1-Me-Pseudo UTP)
MR016 hEPO mRNA (N1-Me-Pseudo UTP)
MR019/MR107 Cas9 mRNA (N1-Me-Pseudo UTP)/Cas9 Mrna
MR205 Cas12bMax Enhanced mRNA (N1-Me-Pseudo UTP)
MR208 enCas12Ultra mRNA (N1-Me-Pseudo UTP)
circRNA MR201 eGFP circRNA
MR202 Luciferase circRNA
saRNA MR301 eGFP saRNA
MR302 Firefly Luciferase saRNA
MR401 eGFP saRNA (5-Methyl-CTP)
MR402 Firefly Luciferase saRNA (5-Methyl-CTP)
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