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非特異性擴增的一個常見來源是DNA聚合酶對錯配序列的延伸和引物二聚體的形成。雖然DNA聚合酶在低溫條件下的活性較弱，可以通過在冰上制備PCR反應混合物來減少非特異性擴增；然而，在 PCR 反應第一步升溫過程中DNA聚合酶仍可催化錯配引物延伸或引物二聚體形成，因而導致非特異性擴增，影響目的片段的合成。因此，提高PCR特異性更加有效的方法是使用熱啟動DNA聚合酶。其中，Taq antibody修飾的熱啟動酶因其快速的熱啟動速度和較高的靈敏度獲得了廣泛的應用。
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Taq antibody修飾熱啟動酶的作用原理
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Taq DNA聚合酶與其抗體（Taq antibody）結合后，活性受到高效封閉，經過95℃ 30s的熱啟動，Taq antibody在高溫下變性，并從Taq DNA聚合酶活性中心脫落，Taq DNA聚合酶的活性得到釋放。通過使用Taq antibody封閉Taq DNA聚合酶常溫下的活性，從而避免引物錯配引起的非特異性擴增，提高擴增特異性。
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近岸蛋白提供嚴格質控的高品質Taq antibody（Cat. No.：Z087），幫助您獲得高特異性的PCR結果。
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產品特點
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高效親和Taq DNA聚合酶，精準封閉酶活
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熱啟動快，DNA預變性的同時即可釋放Taq酶活
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高穩定性，37℃放置0-7天對Taq DNA聚合酶的封閉效果無影響
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嚴格質控，無核酸內切酶/外切酶、RNase、DNase殘留等
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近岸蛋白Taq antibody性能數據
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1、 特異性檢測
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50μl擴增體系中，以50ng人基因組DNA為模板，對特定基因片段（170bp）進行擴增，經Taq antibody修飾的Taq DNA聚合酶相比未經修飾的Taq DNA聚合酶，擴增特異性顯著提高。
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采用對照公司及Novoprotein Taq antibody與Taq DNA 聚合酶孵育得到熱啟動酶做目標基因擴增，同成品熱啟動酶（Control）比較擴增效果，Novoprotein Taq antibody孵育的熱啟動酶特異性更好。
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2、 重復性檢測
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與成品熱啟動酶（Control）及對照公司（Test1）相比，Novoprotein Taq antibody（Test2）孵育的熱啟動酶重復性更好。
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3、 擴增效率檢測
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與成品熱啟動酶（Control）及對照公司（Test1）相比，Novoprotein Taq antibody（Test2）孵育的熱啟動酶的擴增效率更好。
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4、 多重擴增檢測
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與成品熱啟動酶（Control）相比， Novoprotein Taq antibody孵育的熱啟動酶能很好地對低至1ng模板進行10-20重PCR擴增。
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5、 穩定性檢測
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Taq antibody在37℃放置0-7天后封閉Taq DNA聚合酶進行擴增，結果無差異。
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6、 RNase殘留檢測
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配制2個20μl體系，每個體系中加入4μl RNA，一管做陰性對照，另一管加入1μl Taq antibody后，37℃下消化30min，RNA未被消化，證明無RNase殘留。
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擴增體系中RNase Inhibitor的加入與否不影響擴增Ct值，證明無RNase污染。
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7、 DNase殘留檢測
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100bp DNA Ladder中分別加入1U 2U 10U Taq antibody，-20 ℃及37℃保溫2小時后，電泳檢測 DNA Ladder完整性，結果證明無DNase污染。
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感謝客戶友情提供部分數據圖。
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? ? ? 近岸蛋白產品信息
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貨號 |
產品名稱 |
規格 |
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250U / 250U×5 |
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數量有限 先到先得
蘇州近岸蛋白質科技股份有限公司，是一家專注于重組蛋白應用解決方案的高新技術企業，主營業務為靶點及細胞因子類蛋白、重組抗體、酶及試劑的研發、生產和銷售，并提供相關技術服務。公司定位為醫療健康與生命科學領域原料與技術解決方案的上游供應商，致力于為下游客戶提供及時、穩定、優質的產品及服務，助力全球生物醫藥企業和研究機構的技術與產品創新升級。
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