?
非特異性擴(kuò)增的一個(gè)常見來源是DNA聚合酶對錯(cuò)配序列的延伸和引物二聚體的形成。雖然DNA聚合酶在低溫條件下的活性較弱，可以通過在冰上制備PCR反應(yīng)混合物來減少非特異性擴(kuò)增；然而，在 PCR 反應(yīng)第一步升溫過程中DNA聚合酶仍可催化錯(cuò)配引物延伸或引物二聚體形成，因而導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增，影響目的片段的合成。因此，提高PCR特異性更加有效的方法是使用熱啟動DNA聚合酶。其中，Taq antibody修飾的熱啟動酶因其快速的熱啟動速度和較高的靈敏度獲得了廣泛的應(yīng)用。
?
?
?
Taq antibody修飾熱啟動酶的作用原理
?
?
Taq DNA聚合酶與其抗體（Taq antibody）結(jié)合后，活性受到高效封閉，經(jīng)過95℃ 30s的熱啟動，Taq antibody在高溫下變性，并從Taq DNA聚合酶活性中心脫落，Taq DNA聚合酶的活性得到釋放。通過使用Taq antibody封閉Taq DNA聚合酶常溫下的活性，從而避免引物錯(cuò)配引起的非特異性擴(kuò)增，提高擴(kuò)增特異性。
?
?
?
?
?
?
近岸蛋白提供嚴(yán)格質(zhì)控的高品質(zhì)Taq antibody（Cat. No.：Z087），幫助您獲得高特異性的PCR結(jié)果。
?
?
產(chǎn)品特點(diǎn)
?
?
-
高效親和Taq DNA聚合酶，精準(zhǔn)封閉酶活
-
熱啟動快，DNA預(yù)變性的同時(shí)即可釋放Taq酶活
-
高穩(wěn)定性，37℃放置0-7天對Taq DNA聚合酶的封閉效果無影響
-
嚴(yán)格質(zhì)控，無核酸內(nèi)切酶/外切酶、RNase、DNase殘留等
-
?
?
近岸蛋白Taq antibody性能數(shù)據(jù)
?
1、 特異性檢測
?
50μl擴(kuò)增體系中，以50ng人基因組DNA為模板，對特定基因片段（170bp）進(jìn)行擴(kuò)增，經(jīng)Taq antibody修飾的Taq DNA聚合酶相比未經(jīng)修飾的Taq DNA聚合酶，擴(kuò)增特異性顯著提高。
?
?
?
?
?
采用對照公司及Novoprotein Taq antibody與Taq DNA 聚合酶孵育得到熱啟動酶做目標(biāo)基因擴(kuò)增，同成品熱啟動酶（Control）比較擴(kuò)增效果，Novoprotein Taq antibody孵育的熱啟動酶特異性更好。
?
?
?
?
2、 重復(fù)性檢測
?
與成品熱啟動酶（Control）及對照公司（Test1）相比，Novoprotein Taq antibody（Test2）孵育的熱啟動酶重復(fù)性更好。
?
?
?
?
?
3、 擴(kuò)增效率檢測
?
與成品熱啟動酶（Control）及對照公司（Test1）相比，Novoprotein Taq antibody（Test2）孵育的熱啟動酶的擴(kuò)增效率更好。
?
?
?
?
4、 多重?cái)U(kuò)增檢測
?
與成品熱啟動酶（Control）相比， Novoprotein Taq antibody孵育的熱啟動酶能很好地對低至1ng模板進(jìn)行10-20重PCR擴(kuò)增。
?
?
?
5、 穩(wěn)定性檢測
?
Taq antibody在37℃放置0-7天后封閉Taq DNA聚合酶進(jìn)行擴(kuò)增，結(jié)果無差異。
?
?
?
?
6、 RNase殘留檢測
?
配制2個(gè)20μl體系，每個(gè)體系中加入4μl RNA，一管做陰性對照，另一管加入1μl Taq antibody后，37℃下消化30min，RNA未被消化，證明無RNase殘留。
?
?
?
?
擴(kuò)增體系中RNase Inhibitor的加入與否不影響擴(kuò)增Ct值，證明無RNase污染。
?
?
?
?
?
?
7、 DNase殘留檢測
?
?
100bp DNA Ladder中分別加入1U 2U 10U Taq antibody，-20 ℃及37℃保溫2小時(shí)后，電泳檢測 DNA Ladder完整性，結(jié)果證明無DNase污染。
?
?
?
感謝客戶友情提供部分?jǐn)?shù)據(jù)圖。
?
?
?
? ? ? 近岸蛋白產(chǎn)品信息
?
|
貨號 |
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
|
250U / 250U×5 |
掃描下方二維碼申請?jiān)囉醚b
數(shù)量有限 先到先得
蘇州近岸蛋白質(zhì)科技股份有限公司，是一家專注于重組蛋白應(yīng)用解決方案的高新技術(shù)企業(yè)，主營業(yè)務(wù)為靶點(diǎn)及細(xì)胞因子類蛋白、重組抗體、酶及試劑的研發(fā)、生產(chǎn)和銷售，并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)。公司定位為醫(yī)療健康與生命科學(xué)領(lǐng)域原料與技術(shù)解決方案的上游供應(yīng)商，致力于為下游客戶提供及時(shí)、穩(wěn)定、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)，助力全球生物醫(yī)藥企業(yè)和研究機(jī)構(gòu)的技術(shù)與產(chǎn)品創(chuàng)新升級。
詳詢www.novoprotein.com.cn或致電400-600-0940。