膽管癌（CCA）是第二常見(jiàn)的原發(fā)性肝臟惡性腫瘤，5年生存率僅為5%-15%，且發(fā)病率與死亡率持續(xù)上升。盡管在分子腫瘤學(xué)領(lǐng)域取得了進(jìn)展，但膽管癌的預(yù)后仍然很差，這凸顯了開(kāi)發(fā)全新治療靶點(diǎn)的迫切需求。

2025年7月31日，華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院會(huì)同湖北省肝膽胰疾病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、國(guó)家衛(wèi)生健康委器官移植重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室團(tuán)隊(duì)，共同在期刊Gut發(fā)表論文“Targeting Aurora kinase B regulates cholesterol metabolism and enhances chemoimmunotherapy in cholangiocarcinoma”，通過(guò)CRISPR/Cas9敲除篩選，發(fā)現(xiàn)Aurora激酶B（AURKB）在CCA中高表達(dá)且具有強(qiáng)依賴(lài)性。作者在CCA來(lái)源類(lèi)器官（PDO）模型中驗(yàn)證后發(fā)現(xiàn)，AURKB通過(guò)增強(qiáng)腫瘤內(nèi)游離膽固醇的生成促進(jìn)CCA的進(jìn)展，而敲除AURKB能夠顯著改善CCA免疫微環(huán)境、增強(qiáng)T細(xì)胞抗腫瘤活性，相關(guān)抑制劑AZD1152與吉西他濱的聯(lián)合使用更是顯示出顯著的協(xié)同效應(yīng)，能夠顯著增強(qiáng)膽管癌對(duì)化療和免疫治療的敏感性。總之，本文使用類(lèi)器官平臺(tái)揭示了AURKB在CCA中的依賴(lài)性與治療潛力，為臨床轉(zhuǎn)化提供了實(shí)驗(yàn)和模型依據(jù)。

圖：AURKB是CCA的特異性依賴(lài)基因，其高表達(dá)提示預(yù)后不良

為了驗(yàn)證AURKB在膽管癌中的作用，在常規(guī)細(xì)胞系之外，團(tuán)隊(duì)還從多位膽管癌患者的腫瘤組織中分別構(gòu)建了類(lèi)器官模型（PDOs）。這些類(lèi)器官保留了患者特異性以及原代腫瘤的分子及結(jié)構(gòu)特性，在含有EGF、FGF、R-spondin1等生長(zhǎng)因子的專(zhuān)用培養(yǎng)基中擴(kuò)增，是理想的體外實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。團(tuán)隊(duì)隨后在包括PDOs在內(nèi)的多種平臺(tái)上進(jìn)行了AURKB敲除或抑制實(shí)驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，典型的高AURKB表達(dá)的PDOs與體內(nèi)小鼠模型均出現(xiàn)顯著的生長(zhǎng)抑制。該結(jié)果凸顯了AURKB在類(lèi)器官體系中對(duì)CCA生長(zhǎng)的關(guān)鍵依賴(lài)性。

不過(guò)，需要注意的是，由于患者分子背景不同，部分PDOs的AURKB表達(dá)接近正常水平，因此未收到敲除實(shí)驗(yàn)的影響，該結(jié)果也提示，AURKB靶向治療需要先對(duì)患者進(jìn)行分子分型（如IHC或RNA測(cè)序判斷AURKB表達(dá)水平）來(lái)篩選適用人群。

圖：PDOs和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)共同確認(rèn)，AURKB在膽管癌的進(jìn)展中起著不可或缺的作用

接下來(lái)，RNA-seq和靶向脂質(zhì)組學(xué)揭示，AURKB的缺失顯著下調(diào)膽固醇代謝通路，導(dǎo)致膽固醇酯水平及總膽固醇含量減少。這一效應(yīng)依賴(lài)于A(yíng)URKB的激酶活性。與此一致的是，臨床CCA組織的膽固醇水平高于鄰近正常組織，且與AURKB表達(dá)正相關(guān)。

圖：AURKB 通過(guò) NCEH1 增加腫瘤內(nèi)的膽固醇水平

在PDO培養(yǎng)體系中，研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)，AURKB缺失導(dǎo)致膽固醇減少，從而抑制細(xì)胞增殖。而外源性膽固醇補(bǔ)充可繞過(guò)AURKB通路，部分逆轉(zhuǎn)AURKB缺失導(dǎo)致的生長(zhǎng)抑制。相比2D細(xì)胞系，PDO更能保留患者腫瘤在膽固醇積累和代謝通路上的原始特征，驗(yàn)證了AURKB–膽固醇軸在原發(fā)性組織中的生物學(xué)意義，再次證明AURKB主要通過(guò)促進(jìn)游離膽固醇生成驅(qū)動(dòng)CCA進(jìn)展 。

圖：AURKB通過(guò)增強(qiáng)腫瘤內(nèi)膽固醇的生成來(lái)促進(jìn)CCA的進(jìn)展

研究團(tuán)隊(duì)還發(fā)現(xiàn)，AURKB的缺失能夠顯著改善膽管癌的免疫微環(huán)境。scRNA-Seq分析顯示，AURKB缺失的膽管癌模型中T細(xì)胞（尤其CD8?）比例增加，且這些T細(xì)胞表現(xiàn)出更強(qiáng)的細(xì)胞毒性功能和更低的耗竭水平。這一效應(yīng)可以通過(guò)膽固醇補(bǔ)充來(lái)逆轉(zhuǎn)。

以上結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)，AURKB通過(guò)膽固醇依賴(lài)性途徑調(diào)節(jié)T細(xì)胞功能、介導(dǎo)免疫機(jī)制，具有成為臨床靶點(diǎn)的可行性。

圖：AURKB 通過(guò)增加腫瘤中的游離膽固醇來(lái)破壞 CCA 的抗腫瘤免疫微環(huán)境

圖：靶向AURKB可增強(qiáng)CCA治療中對(duì)化學(xué)免疫療法的敏感性

圖：服用辛伐他汀可抑制膽管癌進(jìn)展并增強(qiáng)化學(xué)免疫療法的效果

本文中，患者來(lái)源類(lèi)器官（PDOs）的使用確保了對(duì)靶點(diǎn)AURKB的高保真性。PDO保留了CCA組織特有的膽固醇代謝特征，使得代謝-表型關(guān)聯(lián)實(shí)驗(yàn)更貼近生理?xiàng)l件，因此不僅為揭示CCA關(guān)鍵驅(qū)動(dòng)基因提供了更可靠的平臺(tái)，也為代謝機(jī)制和聯(lián)合用藥的研究奠定了高度生理相關(guān)的模型基礎(chǔ)，凸顯了類(lèi)器官這一新型技術(shù)在新藥篩選和方案優(yōu)化中的應(yīng)用前景。