siRNA和miRNA是研究基因功能的強大工具。siRNA,是一類人工合成的雙鏈RNA分子,長度通常在19-23個核苷酸之間,通過特異性結合并降解細胞內的目標mRNA,實現基因沉默,從而抑制特定基因的表達。miRNA,即microRNA,是一類機體內源產生的的長度約為22個核苷酸的非編碼單鏈RNA分子,能夠通過與mRNA的3'非翻譯區(3'UTR)部分互補結合對基因表達進行調控。
Celthy siRNA/miRNA體外轉染試劑是一款專門針對siRNA和miRNA轉染的轉染試劑,可在廣泛的細胞系中產生超高轉染效率,適用于siRNA/miRNA相關的基因研究,從源頭上解決轉染效率低的難題。
產品優勢
超高轉染效率:憑借優化的配方和轉染機制,能夠出色的將siRNA和miRNA導入細胞
加入1nM siRNA可達到90%以上的沉默效率。
已經驗證過貼壁細胞和懸浮細胞,均可以達到90%以上的基因沉默效率。原代細胞,可達到80%以上的沉默效率。
在廣泛的細胞系中,產品能實現1nM的siRNA可超過90%的表達效率,避免脫靶效應。
極低細胞毒性
通過精心的設計和嚴格的篩選,盡可能減少對細胞的損傷,維持細胞的正常生理功能以及細胞內環境的穩定,提高實驗結果的可靠性。
廣泛的細胞適用性
適用于多種細胞轉染,包括HeLa、mcf7或NIH-3T3等貼壁細胞,以及難以轉染的懸浮細胞系,如K562或THP-1細胞,可達到80%的沉默效率。
Celthy siRNA/miRNA體外轉染試劑具有更高的沉默效率

在多種細胞中驗證具備優異的轉染效率

常見問題
1、DNA轉染和siRNA轉染有什么不同?
1)siRNA由于只有二十幾個堿基對,相比DNA幾千上萬對堿基,小了許多。
2)用于轉染DNA的轉染試劑和方法并不適用于轉染siRNA。
3)siRNA轉染比DNA轉染對轉染試劑細胞毒性的要求嚴格。
2、轉染試劑轉染后需要換液嗎?
對于換液可以區分兩種情況:
1)轉染之前如果沒有換液應在轉染6 小時左右后換液,以保證細胞生長所需營養。
2)如果轉染之前如果有換液,可以按照平時等到培養基出現營養不足時換液。
3、轉染試劑可以凍存嗎?
不可凍存,因為轉染試劑是一種PEI陽離子轉染試劑,低溫下凍存,會破壞PEI轉染試劑的活性,因此最好是4 度儲存,保持最好的轉染效能。
4、若想提高轉染效率,應該怎么操作?
1)保證高純度的siRNA或者miRNA:確保siRNA是經過PAGE純化和脫鹽處理過的,高純度的siRNA或者miRNA有助于獲得較高的轉染效率。
2)保證細胞狀態:通常,細胞密度達到70%-80%才可以進行轉染,且要保證細胞代數較短,生長活力較好,從而避免產生較大的細胞毒性。
3)避免RNA降解:整個實驗過程使用無RNA酶和無熱原性的材料,如離心管、槍頭、緩沖液等。
4)預實驗進行轉染試劑與RNA比例的摸索:不同細胞系對于轉染試劑的耐受度不一樣,適宜的RNA濃度也不一樣,需要預實驗進行梯度實驗摸索,才能在正式實驗時保證較高的轉染效率。
5)保證無血清或者低血清培養環境:嘗試使用無血清或低血清培養基,避免轉染試劑和RNA的結合受到干擾影響轉染效果。轉染時,siRNA和脂質體稀釋液要用Opti-MEM 無血清培養基。轉染后4-6h 可選擇換液。
產品信息
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產品名稱 |
產品貨號 |
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Celthy siRNA/miRNA In vitro transfection reagent |
C130004 |
相關產品
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產品名稱 |
產品貨號 |
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Celthy Univer Liposomal Transfection Reagent |
C130002 |
| C130005 | |
| C130006 | |
| C130007 |
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