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如何高效對細胞進行siRNA和miRNA轉染?

作者:上海魔兜兒生物科技有限公司 2025-03-07T00:00 (訪問量:25468)

siRNA和miRNA是研究基因功能的強大工具。siRNA,是一類人工合成的雙鏈RNA分子,長度通常在19-23個核苷酸之間,通過特異性結合并降解細胞內的目標mRNA,實現基因沉默,從而抑制特定基因的表達。miRNA,即microRNA,是一類機體內源產生的的長度約為22個核苷酸的非編碼單鏈RNA分子,能夠通過與mRNA的3'非翻譯區(3'UTR)部分互補結合對基因表達進行調控。

siRNA和miRNA轉染技術在基因功能研究、疾病機制探索、藥物靶點發現等方面具有重要意義。然而,在實際操作中,由于細胞毒性、轉染體系等問題,常常使得這兩種RNA的轉染并不能如愿進行。那么如何讓轉染能夠更順利地進行呢?今天我們就一起來看看有哪些可以提升轉染效率的措施吧!
 

1.保證高純度的siRNA或者miRNA

確保siRNA是經過PAGE純化和脫鹽處理過的,高純度的siRNA或者miRNA有助于獲得較高的轉染效率。
 

2.保證細胞狀態

細胞狀態對于轉染結果至關重要。通常,細胞密度達到70%-80%才可以進行轉染,且要保證細胞代數較短,生長活力較好,從而避免產生較大的細胞毒性。
 

3.避免RNA降解

整個實驗過程使用無RNA酶和無熱原性的材料,如離心管、槍頭、緩沖液等。
 

4.預實驗進行轉染試劑與RNA比例的摸索

不同細胞系對于轉染試劑的耐受度不一樣,適宜的RNA濃度也不一樣,需要預實驗進行梯度實驗摸索,才能在正式實驗時保證較高的轉染效率。
 

5.保證無血清或者低血清培養環境

嘗試使用無血清或低血清培養基,避免轉染試劑和RNA的結合受到干擾影響轉染效果。
 

6.選擇合適的轉染試劑

不同細胞的敏感度不同,適宜的轉染試劑也有差異,可根據文獻或者個人經驗選擇合適的試劑進行轉染。

Celthy siRNA/miRNA體外轉染試劑
是Arcegen推出的一款專門針對siRNA和miRNA轉染的轉染試劑,可在廣泛的細胞系中產生超高轉染效率,適用于siRNA/miRNA相關的基因研究。從源頭上解決轉染效率低的難題,幫您規避一切可控風險!

本產品具有如下特點

超高轉染效率:憑借優化的配方和轉染機制,能夠出色地將siRNA和miRNA導入細胞,可實現1 nM的siRNA超過90%的表達效率,避免了脫靶效應。

極低細胞毒性:通過精心的設計和嚴格的篩選,盡可能減少對細胞的損傷,維持細胞的正常生理功能以及細胞內環境的穩定,提高實驗結果的可靠性。

廣泛細胞適用性:經過廣泛的測試和驗證,本產品適用于多種細胞轉染,包括Hela、MCF-7、HepG2、CHO等貼壁細胞;對于難以轉染的懸浮細胞系(如:K562或THP-1細胞),部分原代細胞(如:原代人成纖維細胞、原代人肝細胞等),均可達到80%的沉默效率。

測試數據:


圖 Celthy siRNA/miRNA體外轉染試劑與競品T轉染沉默效率比較

產品信息

產品名稱 產品貨號
Celthy siRNA/miRNA In vitro transfection reagent
Celthy siRNA/miRNA體外轉染試劑
C130004



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