PCR-based Genotyping等實驗，常需純化樣本基因組。當待測樣本較多時，純化基因組的過程費時、操作重復，并且實驗成本高。 

直擴PCR直接從樣本開始，以未經基因組純化的微量原始樣本或其裂解產物作為模板，進行PCR-based Genotyping。與常規PCR-based Genotyping相比，直擴樣本用量少，操作簡單，實驗成本低，可高通量化樣本檢測。

圖. Direct PCR技術

A. 直接法：取少量樣本直接加入到PCR Master Mix中，進行PCR鑒定。

B. 裂解法：樣本取樣后，加入裂解液中，裂解釋放基因組，取少量裂解上清液加入到PCR Master Mix中，進行PCR鑒定。

技術優勢   

♦ 直接：無需進行費時而昂貴的DNA純化

♦ 快速：10min完成模板制備，最少50min完成PCR反應

♦ 簡便：樣品無需剪碎或研磨即可完成裂解;PCR Mix為預混液形式，減少加樣步驟

♦ 節省：材料用量少

♦ 高通量：可在96孔板中完成裂解反應

直擴PCR試劑盒類型

實驗過程 

本系列產品運用獨特的蛋白酶裂解體系，裂解樣品，裂解液可直接作為模板，搭配試劑盒中的PCR Master Mix進行基因擴增。

圖. 小鼠組織直擴PCR實驗過程

圖. 植物組織直擴PCR實驗過程

 產品性能

1、基因敲除小鼠基因型鑒定

圖. 小鼠直擴PCR試劑盒檢測基因敲除直擴結果

M：100bp DNA ladder。1-8：以裂解產物為模板。+：以50ng純化基因組DNA為模板。﹣：以去離子水為模板。循環數：35個循環。

單條帶（580bp）：敲除動物純合子基因組。單條帶（180bp）：野生型基因組。兩條帶（580bp/180bp）：敲除動物雜合子基因組。

2、小鼠基因釋放更快速、更充分

圖. 小鼠組織直擴PCR試劑盒不同裂解時間直擴結果

M：100bp DNA ladder。+：以50 ng純化基因組DNA為模板。循環數：35個循環。

圖. 鼠尾經不同裂解方式處理后的直擴結果。

檢測基因：SOX21。M：100 bp DNA ladder。1-2：以常規堿裂解方式處理裂解產物為模板。

3-4：以小鼠組織直擴PCR試劑盒裂解產物為模板。+：以50 ng純化基因組DNA為模板。﹣：以去離子水為模板。循環數：35個循環。 

3、小鼠直擴表現優于競品

圖. 鼠尾經不同品牌同類產品裂解處理后的直擴結果

檢測基因：SOX21。M ：100 bp DNA ladder。+ ：以50 ng純化基因組DNA為模板。循環數：35個循環。

4、多類型植物樣本驗證表現優異

圖. 不同類型植物葉片直擴結果

M：100 bp DNA ladder。C：相應植物純化基因組DNA為模板。1-2：葉片組織裂解產物為模板。循環數：30個循環。

5、多類型血液樣本驗證表現優異

圖. 使用Positive control primer mix引物直接從不同物種、不同抗凝劑的全血及血卡中擴增237 bp的DNA片段。

血液模板濃度為10%，血卡模板為1 mm2大小。NTC為DEPC水作為模板，PC為提取純化的人基因組DNA作為模板。1.人EDTA抗疑血(-20°C)；2.小鼠EDTA抗凝血（新鮮）；3.山羊EDTA抗凝血(-80℃)；4.人血卡；5.人肝素抗疑血(-80°C)；6.雞肝素抗凝血（新鮮）；7.豬檸檬酸鈉抗疑血(4°C)；8.NTC ；9.PC。

6、血液樣本耐受性最高可達40%

圖 含肝血抗凝血人血液直擴2kb、71%GC目的片段結果

血液模板濃度設置0.5-50%，延伸時間10 s/kb。

圖 含EDTA抗凝血小鼠血液直擴2.2kb、67%GC目的片段結果

血液模板濃度設置0.5-50%，延伸時間10 s/kb。

客戶反饋
1、北京客戶：小鼠基因型鑒定效果優異

圖. 使用Arcegen小鼠直擴PCR試劑盒進行小鼠基因型鑒定結果 

2、武漢客戶：水稻基因直擴效果優異

圖. 使用Arcegen植物直擴PCR試劑盒擴增水稻相關基因

3、上?？蛻簦貉褐睌UPCR在競品中表現優異。

圖 使用Arcegen血液直擴PCR直接從人全血擴增不同長度DNA片段

血樣為-20℃儲存的EDTA抗凝血，血液模板濃度為10%，延伸時間10 s/kb。

237 bp；2. 150 bp (30%GC)；3. 120 bp (75%GC)；4. 2.1 kb (30%GC)；5. 2 kb (71%GC)；6. 4 kb (68%GC)；7. 5 kb (65% GC)；8. 8 kb (48% GC)

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