細胞外基質凝膠是一種從EHS小鼠腫瘤中提取的可溶性基底膜制劑，富含細胞外基質蛋白。其主要成分包括層粘連蛋白、IV型膠原、肝素硫酸蛋白多糖（HSPG）、nidogen，以及TGF-beta、EGF、IGF、FGF、組織型纖溶酶原激活劑等生長因子，這些生長因子是EHS腫瘤固有的。在20世紀80年代中期，丹麥的J. Engelbreth-Holm和Richard Swarm分別發現并特別描述了細胞外基質凝膠。主要的生產過程包括用生理鹽水提取/洗滌腫瘤勻漿以獲得可溶性蛋白，然后從產品中提取不溶性復合物的溶劑提取，以及在低溫下用緩沖溶液進行透析以獲得無色至淡黃色的溶液。

細胞外基質凝膠為組織和細胞提供了支持、拉伸強度和支架支持。它還作為細胞粘附和移動的三維結構，以及生長因子、趨化因子和細胞因子的儲存庫。此外，它還可以被用作細胞形態發生和分化的信號分子。

圖：細胞外基質凝膠的應用指南

以下是使用由Arcegen Biologicals開發和生產的Arcegel細胞外基質凝膠及其他相關試劑進行實驗所得到的結果。

侵襲實驗和3D培養

侵襲實驗

血管生成

圖：HUVEC細胞血管生成實驗結果及血管免疫熒光染色

體內成瘤

圖：將HepG2細胞皮下植入到雌性BALB/c-nu小鼠體內，并觀察了1個月。

腫瘤類器官培養

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Wnt3a類器官培養案例的結果

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其他類器官培養試劑

附錄

問：如何解凍Arcegel基質凝膠，需要多長時間才能解凍？

答：將整瓶Arcegel基質凝膠放入裝有碎冰的盒子中，然后將盒子放入4°C的冰箱中過夜解凍，確保有足夠的碎冰。解凍后，旋轉瓶子檢查Arcegel基質凝膠是否完全解凍，確保沒有冰晶或凝膠塊殘留。我們建議過夜解凍，而蛋白質濃度較高的Arcegel基質凝膠可能需要更長時間。不要直接將Arcegel基質凝膠的瓶子放入4°C冰箱中解凍，也不要將裝有Arcegel基質凝膠的冰盒放在冰箱門上或靠近冰箱門的地方。下圖供參考：

問：Arcegel基質凝膠解凍后的狀態是怎樣的？

答：標準的Arcegel基質凝膠解凍后應為清澈的液體，不含酚紅，這表明其清晰透明；蛋白質濃度越高，解凍后的液體粘度越大。請參考下圖中的Arcegel基質凝膠解凍后的狀態，左邊兩瓶是高濃度型，右邊兩瓶是標準型。

問：如何分裝和冷凍Arcegel基質凝膠以備使用？

答：解凍后，Arcegel基質凝膠可以分裝到多個小管中，這些管子都應該是預冷的冷凍管，快速冷凍并儲存，以避免反復凍融。使用過程中涉及的所有物品在使用前都應預冷，包括預冷的移液槍、槍頭和管子來處理基質凝膠。

問：在融化Arcegel基質凝膠時發現凝膠，為什么無法融化？

答：Arcegel基質凝膠對溫度非常敏感。其在超過10°C的溫度下開始凝膠化，而在超過22°C的溫度下凝膠化過程會加速。如果即使在正常條件下接收后也發生凝膠化，這可能是因為融化程序不當或在融化過程中環境溫度上升，導致部分凝膠化。因此，必須嚴格按照融化程序指南操作，并確保在融化過程中保持低溫環境。

問：如何稀釋Arcegel基質凝膠？

答：通常，Arcegel基質凝膠可以與預冷的無血清培養基或pH 7.4的PBS稀釋。由于不同批次之間的濃度可能存在差異，建議根據具體的工作濃度進行稀釋，而不是使用比例稀釋或稀釋因子。

問：使用Arcegel時應注意哪些事項？

答：所有與Arcegel基質凝膠接觸的耗材和試劑都應預冷，整個操作過程應在冰上進行，以保持低溫環境。Arcegel基質凝膠對溫度非常敏感，一旦溫度超過10°C就開始凝膠化。

細胞因子使用指南：

離心：收到后，瓶內含有凍干粉末。在打開前，快速離心10,000-12,000 rpm 30秒，以確保任何可能脫落的蛋白質附著在瓶蓋或瓶壁上，沉積在瓶底。

復溶：根據說明，用指定的溶劑復溶，目標濃度范圍為0.1-1.0 mg/mL。注意：避免劇烈渦旋，因為這可能導致蛋白質變性。用移液槍頭輕輕敲打或讓溶液在室溫下放置一段時間可以幫助溶解。

稀釋：用含有0.1% BSA、10% FBS或5%海藻糖的PBS或基礎培養基溶液稀釋（確保無菌）。使用上述任何一種稀釋劑稀釋復溶的蛋白質溶液，根據所需的工作濃度調整稀釋濃度，但不低于10 μg/mL。分裝到小管中，儲存在-20至-80°C。

使用：需要時，解凍一份分裝的細胞因子，并加入到培養基中以達到所需的濃度。避免細胞因子反復凍融。