?
?
在科研和細胞工程等領域中構建穩定表達細胞株，經常需要實現多個基因的穩定共表達，目前常用的策略是多重感染、多重分離篩選等，然而這種方式存在很多弊端：①真核細胞中可使用的篩選標記數量有限；②實驗周期長；③同時使用多個不同的篩選基因可能對細胞產生不利影響；④多基因串聯，病毒包裝效率低等；以上問題為篩選多基因共表達的穩轉株在時間和成本等方面提出了挑戰。因此，有必要開發新的技術手段解決以上問題。
維真生物建立了一種可簡單快速地實現多基因共表達的分裂篩選系統！
?
目前，我們已經利用上述系統，成功獲得了共表達四種轉錄因子（Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4）的IPS穩轉細胞系。 如上圖所示，我們將四種轉錄因子構建到兩個慢病毒載體中并包裝成慢病毒。隨后將兩個質粒與慢病毒分別轉導或者共轉293A細胞，Puro篩選后，我們發現沒有“攝取”到載體和只“攝取”到一種載體的細胞大量死亡，而“攝取”到雙載體的細胞存活率較高。并且，雙載體“攝取”組細胞四種轉錄因子的表達水平均有顯著增加。這說明，大量的雙慢病毒載體成功進入同一細胞，表達了完整的抗生素蛋白，且四種轉錄因子均實現了過表達。 （點擊可看大圖） 圖2. 質粒轉染后結果 圖3. 慢病毒感染后結果 結語：
?