嵌合抗原受體（CAR）T細胞療法在治療血液系統惡性腫瘤方面目前已經取得了顯著成功，但其在實體瘤治療中仍面臨三大核心障礙：腫瘤特異性抗原缺失、T細胞歸巢與浸潤能力不足以及免疫抑制性的腫瘤微環境（TME）。為突破這些局限，科學界正積極探索多種聯合策略，其中，將CAR-T細胞療法與免疫檢查點抑制劑、放療或溶瘤病毒聯合使用，已被證實有改善臨床療效的潛力。
? 作為一種理想的聯合治療藥物，溶瘤病毒是一種能選擇性感染并裂解癌細胞的病毒。其作用機制不僅在于直接溶瘤，更在于能誘導腫瘤細胞發生免疫原性細胞死亡，釋放信號，從而將“冷”腫瘤轉化為免疫細胞富集的“熱”腫瘤。此外，經過基因工程改造、可表達細胞因子或趨化因子（如CXCL9、CXCL11）的溶瘤病毒，能進一步重塑TME，增強免疫細胞浸潤，與CAR-T療法產生強大的協同效應。因此，溶瘤病毒被視為增強CAR-T實體瘤療法的理想輔助手段。
? 這一思路在最新研究中得到了有力印證。2025年7月發表于期刊《Journal for ImmunoTherapy of Cancer》的一項研究《hCCL19-expressing recombinant Newcastle disease virus boosts CAR T cell infiltration and efficacy in solid tumor》闡明，一種表達人CCL19的重組新城疫病毒（rNDV19）與CAR-T細胞的聯合療法，能通過增強免疫細胞浸潤與活化，有效克服實體瘤治療瓶頸，為將“冷”腫瘤轉化為“熱”腫瘤提供了切實可行的新策略。
該研究基于新城疫病毒Italien株（iNDV）構建了表達人CCL19的重組病毒rNDV19。該病毒保留天然溶瘤活性，并能分泌CCL19趨化因子。研究團隊將其與多西環素誘導的CD147-CAR-T細胞聯用，旨在利用CCL19介導的趨化作用招募CCR7+ T細胞（包括中央記憶T細胞和干細胞記憶T細胞）浸潤腫瘤。通過原位肺癌模型證實，rNDV19可通過調控腫瘤微環境增強CAR-T細胞的募集與活化，為克服實體瘤中CAR-T細胞浸潤不足的難題提供了新型聯合治療策略。
rNDV19表達hCCL19并保持腫瘤選擇性的溶瘤特性
研究者將rNDV19經過工程化改造，將hCCL19基因插入HN和F基因之間，并通過測序驗證（圖1a）。為評估插入的基因是否影響病毒復制，同時比較了rNDV19感染或iNDV感染的細胞上清液中的病毒滴度。結果顯示，rNDV19的復制能力與iNDV相當（圖1b）。
為評估rNDV19的腫瘤選擇性細胞毒性，研究者測量了NCI-H460（腫瘤細胞）、BEAS-2B（正常細胞）和來自三名健康供體的PBMCs的活力。在NCI-H460細胞中，與PBS相比，iNDV和rNDV19在感染后72小時均顯著降低細胞活力，兩種病毒之間無差異。在正常細胞（BEAS-2B和PBMCs）中，iNDV和rNDV19均不影響細胞活力（圖1c），證實rNDV19保留了與野生株相同的腫瘤選擇性細胞毒性。
圖1（a-c）.表達人CCL19的重組新城疫病毒的構建與特性研究
rNDV19表達的hCCL19在體外吸引淋巴細胞
研究證實，rNDV19感染的腫瘤細胞能成功表達并分泌hCCL19蛋白，且其表達水平隨時間推移而增加。通過趨化遷移實驗進一步驗證了其生物學功能，結果顯示，rNDV19產生的hCCL19能有效吸引免疫細胞發生遷移。機制研究表明，這一趨化作用是通過hCCL19與其受體CCR7的特異性結合所介導的（圖1d-f）。尤為關鍵的是，對CAR-T細胞亞群的分析顯示(圖1 f)，其中有相當一部分細胞表達CCR7受體，這些細胞亞群通常與更好的治療預后相關。該發現從機制上解釋了rNDV19如何作為“增強劑”，利用其表達的hCCL19主動招募CAR-T細胞向腫瘤部位浸潤，從而有望解決CAR-T療法在實體瘤中浸潤不足的問題。
圖1（d-f）.表達人CCL19的重組新城疫病毒的構建與特性研究
rNDV19在體內促進CAR-T細胞的持續浸潤?
為探究rNDV19能否增強CAR-T細胞的腫瘤浸潤，研究者在原位肺癌小鼠模型中評估了不同治療策略的效果（圖2a）。結果顯示，rNDV19在腫瘤組織中的復制動力學與親本病毒iNDV相似，并成功介導了hCCL19的表達，證實其兼具溶瘤與遞送趨化因子的雙重功能（圖2b, c）。
在驗證此基礎后，進一步的分析表明，與CAR-T細胞聯合使用時，rNDV19治療組在后期表現出顯著的腫瘤面積縮小，其效果優于其他對照組，展現了強大的抗腫瘤療效（圖2d, e）。
圖2.rNDV19在腫瘤組織中有效復制，并與CAR-T細胞協同降低腫瘤負荷
rNDV19與CAR-T細胞聯合療法增強抗腫瘤免疫應答的轉錄組特征
轉錄組分析表明，rNDV19與CAR-T細胞聯合治療可誘導獨特的抗腫瘤免疫特征。與對照組相比，聯合治療組差異表達基因數量顯著增加且呈現獨特轉錄譜（圖3a,b）。功能富集分析顯示該療法特異性激活T細胞活化、白細胞趨化及細胞因子產生等關鍵免疫通路（圖3b）。進一步分析證實聯合治療可促進CD4+ T細胞、CD8+ T細胞及樹突狀細胞等多類免疫細胞在腫瘤微環境中富集（圖3c），并通過調節趨化因子信號通路增強免疫細胞遷移能力。這些證據共同表明rNDV19能有效激活腫瘤免疫微環境，提升CAR-T細胞治療效果。
圖3.rNDV19與CAR-T細胞聯合療法增強抗腫瘤免疫應答的轉錄組特征
rNDV19與CAR-T細胞聯合療法的協同抗腫瘤效應
本研究通過系統評估rNDV19與CAR-T細胞聯合治療在原位肺癌模型中的療效，證實該聯合策略能顯著提升治療效果。研究人員將荷瘤小鼠分為六個治療組（含對照組、單藥組及聯合治療組）。生存分析顯示，聯合治療組小鼠生存期顯著延長，死亡風險明顯降低（圖4a, 4b）。相較于單藥治療，聯合治療組展現出顯著生存優勢。通過設立CAR-T細胞失活對照組，證實療效依賴活性CAR-T細胞的特異性作用（圖4c）。生物發光成像顯示聯合治療能有效抑制腫瘤進展（圖4d），同時減輕治療相關的體重下降等副作用（圖4e）。該研究證實rNDV19能通過協同作用增強CAR-T細胞的抗腫瘤效能，在延長生存期、控制腫瘤負荷及改善治療耐受性方面展現出顯著優勢，為臨床轉化提供重要依據。
圖4.rNDV19與CAR-T細胞的聯合治療顯著延長了荷瘤小鼠的生存期
該研究首次證實，表達hCCL19的重組新城疫病毒（rNDV19）可通過系統性給藥與CAR-T細胞協同作用，顯著增強免疫細胞在原位肺癌模型中的浸潤深度與活性。轉錄組分析顯示聯合治療特異性激活T細胞趨化與分化關鍵通路，促使免疫微環境由"冷"轉"熱"。生存研究證實該策略能顯著延長荷瘤小鼠生存期并降低腫瘤負荷，其療效依賴于活性CAR-T細胞的功能協同，為溶瘤病毒與細胞免疫聯合治療實體瘤提供了創新性解決方案。
上述前沿基礎研究成功將溶瘤病毒聯合療法推向新的高度，而其從實驗室概念到臨床轉化，離不開成熟的工藝平臺與系統的臨床前研發支持。迪福潤絲生物正是依托其全球領先的重組病毒載體技術平臺，為此類創新療法的開發提供全流程CRO解決方案。
迪福潤絲生物溶瘤病毒候選株構建服務
迪福潤絲生物在溶瘤病毒藥物的臨床前研究方面具備系統化平臺能力。公司通過對病毒株基因組進行改造，以提升溶瘤病毒的抗腫瘤活性。目前，公司可改造的溶瘤病毒載體涵蓋新城疫病毒（NDV）、水皰性口炎病毒（VSV）、單純皰疹病毒（HSV-1）等，已建立起多種類型的小鼠腫瘤模型，可為不同腫瘤提供系統性的溶瘤病毒有效性評價服務。
服務內容：
服務案例：
圖5. 以NDV為載體的改造溶瘤病毒候選株（NDV-OV1,NDV-OV2,NDV-OV3）給藥后，成瘤小鼠腫瘤體積變化。A:LLC成瘤小鼠；B:B16F10成瘤小鼠。
圖6. 以VSV為載體的改造溶瘤病毒候選株(VSV-OV1)給藥后，成瘤小鼠腫瘤體積變化。A:LLC成瘤小鼠；B:B16F10成瘤小鼠。
DIFF溶瘤病毒平臺核心優勢：
基于迪福潤絲反向遺傳操作技術平臺（Viraltech Architect），可對絕大部分病毒進行基因工程改造。平臺通過模塊化的DCVL（Design-Construct-Verify-Learn）的方式，進行實驗數據積累與更新迭代。
DIFF NDV載體優勢：
DIFF VSV載體優勢：
迪福潤絲生物依托全球領先的重組病毒載體技術平臺，為溶瘤病毒療法提供全流程CRO專業支持：從溶瘤病毒候選株構建（如新城疫病毒NDV、水皰性口炎病毒VSV載體等）、到動物模型藥效評價以及活體成像分析。公司擁有杭州唯一一家專注于P2病毒類動物模型評價的企業實驗室，加速創新療法從實驗室向臨床轉化，助力企業IND申報成功！
參考文獻：
Liu M, Li C, Feng L T, et al. hCCL19-expressing recombinant Newcastle disease virus boosts CAR T cell infiltration and efficacy in solid tumor. Journal for ImmunoTherapy of Cancer. 2025;13:e011783