在細胞實驗中,細胞轉染大概是最常用、最基礎的實驗技能。轉染細胞的方法很多,PEI(polyethylenimine,聚乙烯亞胺)轉染是其中一種性價比極高的轉染方法。在HEK293和CHO等細胞中轉染效率較高,常用于大規模瞬時轉染表達。與磷酸鈣相比,PEI轉染試劑制備容易,適用的細胞種類更多,性價比也更高;而與脂質體等轉染試劑相比,對細胞毒性小。難以瞬時轉染的細胞,用PEI進行慢病毒包裝,也非常方便,病毒滴度滿足大多數細胞的穩轉要求。
PEI的轉染原理是:PEI是一種帶有高電荷陽離子的多聚物,能將 DNA 縮合成帶正電荷的微粒,這些微??梢责ず系綆в胸撾姾傻募毎砻鏆埢?,并通過胞吞作用進入細胞。一旦進入細胞,胺的質子化導致反離子大量涌入以及滲透勢降低,在低pH環境中實現DNA胞內釋放。最被接受的觀點是PEI上未質子化的胺可以在與膜結合的細胞器(如溶酶體)中吸收氫離子,這將導致更多氫離子的流入,同時帶來更多的氯離子和水,誘發滲透溶脹。而質子化胺之間的排斥引起PEI構象的改變,上述變化導致的滲透膨脹使囊泡釋放聚合物與 DNA 形成的復合物進入細胞質。復合物拆解后,DNA 能自由的融合到細胞核中。

Celthy Polyethylenimine Linear (PEI) 轉染試劑是一種化學合成、不含動物源成分、經優化改造后的線性化PEI轉染試劑,同時針對較難的細胞提升了轉染效率。
產品特點
適合轉染DNA, 細胞密度在70%~80%時,轉染效率可以達到80%以上;
既適合貼壁細胞,也適合懸浮細胞轉染,可滿足瞬時轉染和穩定轉染;
轉染細胞形態良好并表達大量的目的蛋白,適用于大規模的轉染;
純化學合成,不含動物源成分,細胞毒性極低;
兼容抗生素與血清。
產品性能
轉染效率80-90%
左圖. Celthy PEI轉染GFP質粒到貼壁細胞Hek-293,72h后,轉染效率達到90%。
右圖. Celthy PEI轉染GFP質粒到懸浮細胞CHO-K1,72h后,轉染效率達到80%。
更高的轉染效率

圖. 用AAV-GFP表達質粒轉染懸浮細胞293V細胞后的48h熒光圖(質粒與試劑比例為1:1)。
左圖為Arcegen PEI轉染試劑,右圖為其他PEI產品。

圖. 用AAV-GFP表達質粒轉染貼壁細胞293T細胞后的48h熒光圖(質粒與試劑比例為1:1)。
左圖為Arcegen PEI轉染試劑,右圖為其他PEI產品。
產品常見問題
1、轉染試劑能否凍存凍?
轉染試劑不可以凍存,應于2-8℃保存。
2、轉染后是否需要換液?
若轉染前進行了換液,可不進行換液,若需要換液可在轉染后6-8h可以進行換液。
3、轉染的時候是否需要無血清培養基培養?
制備復合物的時候需要使用無血清培養基,加入細胞中的時候不要求無血清培養。
產品訂購
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產品應用 |
產品名稱 |
產品貨號 |
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293細胞 DNA,AAV/LV載體研發與工藝開發 |
C130006 |
相關產品
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產品應用 |
產品名稱 |
產品貨號 |
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貼壁細胞 DNA(<10kb)siRNA |
Celthy Univer Liposomal Transfection Reagent |
C130002 |
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AAV專用 工業大批量轉染 |
C130005 | |
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貼壁及懸浮細胞 siRNA、miRNA,難轉染的也可以 |
Celthy siRNA/miRNA In vitro transfection reagent |
C130004 |
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貼壁及懸浮細胞 mRNA,難轉染的也可以 |
Celthy mRNA Transfection Reagent Celthy mRNA 轉染試劑 |
C130007 |
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