一、常見十問

1. 為什么要用裸鼠而不用普通的小白鼠？

裸鼠是無胸腺等免疫器官，免疫力低，對(duì)腫瘤細(xì)胞沒有免疫作用，容易成瘤。而常規(guī)的小白鼠具有正常免疫力的動(dòng)物，移植腫瘤細(xì)胞后，會(huì)出現(xiàn)免疫排斥反應(yīng)，進(jìn)而可能會(huì)影響成瘤效果。

2. 按照正確步驟操作后，為什么沒有腫瘤長出來？

可能原因：1、細(xì)胞狀態(tài)差；2、細(xì)胞不易成瘤，需要加入基質(zhì)膠輔助或增加細(xì)胞接種量，甚至更換細(xì)胞系再測試。3、小鼠周齡不合適，免疫功能完善導(dǎo)致無法成瘤，或者小鼠產(chǎn)生免疫排斥，需要更換免疫缺陷程度更大的小鼠進(jìn)行測試。4、腫瘤生長速度滿一周左右時(shí)間可以觀察到腫塊出現(xiàn)，瘤體形成時(shí)間可能需要1-2個(gè)月，注意觀察和記錄。

3. 瘤體長出來后又消失是什么原因呢？

腫瘤細(xì)胞接種后，如果出現(xiàn)腫瘤塊先縮小，后變大的現(xiàn)象，可能是炎癥反應(yīng)，腫瘤細(xì)胞被機(jī)體自身吸收導(dǎo)致瘤體縮小或消失。若后續(xù)瘤體依舊沒有變大，可以更換免疫缺陷程度更大的小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。

4. 同一實(shí)驗(yàn)組內(nèi)出現(xiàn)瘤體大小不一是什么原因？

可能和小鼠個(gè)體差異、周齡大小、接種的細(xì)胞量、接種操作等有關(guān)。

5. 瘤體長到多大才合適？

根據(jù)動(dòng)物倫理與福利的規(guī)定，小鼠腫瘤重量不可超過小鼠體重的10%，任何一個(gè)維度的瘤體大小不應(yīng)該超過15mm。其中探究與疾病相關(guān)的生物標(biāo)志物動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)周期較短，可選用150-250mm³范圍的腫瘤；探究藥物治療效果，實(shí)驗(yàn)周期較長，建議使用50-150mm³范圍的腫瘤。

6. 腫瘤形態(tài)奇形怪狀，如何準(zhǔn)確測量？

接種細(xì)胞懸液后，每日觀察裸鼠的狀態(tài)和行為表現(xiàn)，注意任何異常反應(yīng)并作記錄。位于動(dòng)物體表的瘤體可以用游標(biāo)卡尺測量，位于體內(nèi)的瘤體可以通過動(dòng)物活體熒光顯像等測量，或者動(dòng)物安樂死后進(jìn)行測量。較為準(zhǔn)確的腫瘤體積計(jì)算公式：體積=（長度*寬度²）/2。

7. 為了增加成瘤的成功率，是否可以在同一只小鼠上多點(diǎn)接種？

不可以，一只小鼠只能接種一點(diǎn)， 若多點(diǎn)接種后形成多個(gè)瘤體，可能會(huì)相互影響。

8. 皮下成瘤過程中，小鼠出現(xiàn)壞死或潰瘍的現(xiàn)象，該如何處理？

可能存在感染問題，建議對(duì)小鼠進(jìn)行藥物治療或抗生素的預(yù)防等。若壞死或潰瘍病灶長度不超過1.5cm，且持續(xù)超過48-72h不愈合，可能需要實(shí)行安樂死處理。

9. 如何處理成瘤實(shí)驗(yàn)研究后的小鼠？

按照所在研究機(jī)構(gòu)的動(dòng)物倫理與福利的相關(guān)規(guī)定，需設(shè)置適當(dāng)?shù)娜说姥芯恐攸c(diǎn)，當(dāng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)以下癥狀時(shí)需要實(shí)行安樂死：動(dòng)物體重持續(xù)下降、動(dòng)物各器官排泄分泌物、嚴(yán)重腹瀉、瘤體快速增長造成潰爛、壞死或感染等。

10. 如何判斷腫瘤是否出現(xiàn)了轉(zhuǎn)移?

①病理剖檢。如果腫瘤出現(xiàn)了轉(zhuǎn)移,在肝臟或者腎臟等組織上肉眼可見明顯轉(zhuǎn)移灶。

②小動(dòng)物活體成像。如果接種的腫瘤細(xì)胞帶有熒光標(biāo)簽或者熒光素酶,可以借助小動(dòng)物活體成像儀進(jìn)行觀察腫瘤轉(zhuǎn)移情況。

③小動(dòng)物核磁。核磁技術(shù)可以更明細(xì)那地觀察到腫瘤細(xì)胞在肝臟,肺臟或者其他器官的轉(zhuǎn)移情況。

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