腸道類器官作為一種高度模擬真實腸道結構和功能的體外模型,已成為研究腸道生理、病理以及疾病機制的重要工具。培養小鼠腸道類器官的過程需要精確控制培養條件和細胞因子的添加,不同階段需要的細胞因子也不盡相同。

一 初始培養階段(干細胞增殖)
培養基:基礎培養基(如DMEM/F-12)。
生長因子:
Wnt-3a:激活Wnt信號通路,維持干細胞的自我更新。
R-spondin-1:增強Wnt信號,促進干細胞增殖。
EGF(表皮生長因子):促進細胞增殖。
抑制因子:
Noggin:抑制BMP信號,維持干細胞未分化狀態。
二 分化誘導階段
繼續使用DMEM/F-12等基礎培養基。
Activin A和FGF2:在分化初期加入,促進定形內胚層的形成。
IL-22:在分化中期加入,促進潘氏細胞的分化。
CHIR99021(GSK3β抑制劑):用于調控Wnt信號通路,促進細胞分化。
可去除或減少某些增殖因子,如適當降低EGF的濃度,減少對細胞增殖的過度刺激。
三 維持與長期培養階段
在類器官分化完成后,進入維持與長期培養階段,此時培養基的調整主要是為了維持類器官的穩定性和功能。
基礎培養基:繼續使用適合的培養基。
維持因子:根據需要調整Wnt信號通路的激活或抑制,如適當調整Wnt-3a和Noggin的濃度。
去除分化誘導因子:如逐漸減少或去除Activin A、FGF2等分化誘導因子。
四 注意事項
培養基的更換頻率:通常每2-3天更換一次培養基,以保證營養成分的充足和代謝廢物的清除。
監測類器官狀態:定期觀察類器官的形態和生長狀態,及時調整培養條件。
無菌操作:整個培養過程需嚴格遵守無菌操作規范,避免污染。
通過上述階段性的培養基調整,可以有效誘導小鼠腸道類器官的成功分化,并維持其長期穩定培養。Arcegen不但提供上述小鼠腸道類器官培養所需的基礎培養基和細胞因子,還提供現成的小鼠腸道類器官培養基套裝3DCultr Intestinal Organoid Growth Medium (Mouse),使用便捷,操作簡單,更好助力您的科研之路。
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貨號 |
產品名稱 |
產品貨號 |
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小鼠腸道類器官培養基 |
C231105 | |
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基礎培養基 |
C231114 | |
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類器官培養細胞因子 |
C230259 | |
| C230225 | ||
| C230257 | ||
| C230254 | ||
| C230227 | ||
| C230462 | ||
| C230221 | ||
| C230520 | ||
| C230241 | ||
| C230295 | ||
| C230522 | ||
| C230399 |
