在細胞轉染實驗中，血清的使用一直是一個備受爭議的話題。那么，血清究竟對細胞轉染有何影響？實驗時到底該不該加血清？今天我們就來深入探討這個問題。
血清是細胞培養基中的重要成分，含有蛋白質、生長因子、激素等，能夠支持細胞生長和存活。然而，在轉染過程中，血清的作用卻較為復雜：
一 降低轉染效率
血清中的蛋白質（尤其是帶負電的蛋白質）可能干擾陽離子脂質體等轉染試劑與核酸的結合，影響復合物的形成，從而降低轉染效率。
對于傳統的脂質體轉染試劑（如Lipofectamine2000），血清的存在可能導致轉染復合物不穩定，甚至引發細胞毒性。
二 增加細胞存活率
血清能提供營養因子，幫助細胞在轉染過程中維持健康狀態，減少因轉染引起的細胞應激和死亡。
對于某些敏感細胞（如原代細胞或干細胞），無血清條件可能導致細胞狀態惡化，影響實驗結果。
那么細胞轉染到底需不需要血清？
答案是：取決于細胞轉染的階段和細胞類型。
轉染階段
1.復合物形成階段
需要無血清條件：在DNA脂質體復合物形成階段必須使用無血清培養基（如Opti MEM），否則血清中的蛋白會干擾復合物形成，血清中的核酸酶（如DNase、RNase）可能降解未完全保護的核酸，也會影響復合物的形成。
2.轉染階段
允許含血清轉染：目前市面上的轉染試劑，普遍能在血清存在下不受干擾遞送核酸，因此無需在轉染過程中去除血清，建議轉染時使用含血清培養基，尤其是比較脆弱的細胞類型。
細胞類型
不同細胞類型反應不同，例如，HeLa、293T等細胞在無血清條件下轉染效率較高，而某些原代細胞或難轉染細胞可能需要血清來維持活性。對于原代細胞、干細胞，建議選擇兼容血清的轉染試劑。不同的實驗條件和操作對于轉染效果也有影響。因此，對于新細胞系，建議測試含血清vs.無血清條件下的轉染效率，選擇最佳方案。
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C130010 |
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