摘要:近期,一篇發表在《Nature Protocols》的文章描述了如何培養離體的成年斑馬魚心臟組織,并將其應用于心外膜組織再生研究和心臟疾病的治療靶點識別。不同于其他將斑馬魚心外膜細胞分離培養的方法,此處是在一個完整的心臟表面培養心外膜細胞,因此更符合體內的細胞行為,是心臟再生體系研究一個很好的補充和延伸。

斑馬魚之所以能被用來研究不同類型損傷導致的心臟組織缺失或損壞,是因為斑馬魚的心臟在受損后能通過心肌細胞的增殖再生而得到恢復,這就為心臟組織再生研究提供了一個非常有價值的系統模型。其中對心外膜的研究更是廣受歡迎,因為無論是在斑馬魚還是在哺乳動物上的研究都已經證明了心外膜在心臟再生中的價值。
文章中描述的這個體外移植系統(下圖為整個過程的概覽),不僅能夠維持幾個星期的活性,更能保持大部分的心臟形態和收縮功能。利用這種方法和分子遺傳工具可以實時監控并報告成年斑馬魚心外膜組織的再生能力。此外,這種外植體培養系統還可適于組織移植和化學篩選。

之前的研究中,通過生成的轉基因工具來破壞斑馬魚的心外膜后發現,心外膜是受損心臟恢復正常所必須的。而在該體外外植體培養系統的幫助下,研究員們意外地發現心外膜本身在受損后也會再生(下圖)。此系統在心外膜細胞基因調控,增殖,遷移和整體再生的細胞和分子機制研究中有極大的優勢。

此外,該系統還適用于原位雜交中的基因表達檢測、組織與組織相互作用研究等。外植體培養體系的一個明顯的應用是化學篩選:例如,在心臟表面上測試數百或數千的化合物對心外膜細胞行為的影響。
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