一、實驗材料
Arcegen標準基質膠(Cat#C231001）、DMEM、PBS緩沖液、去離子水、4%多聚甲醛、0.1%結晶紫染色液、24孔細胞培養板、Transwell小室（8μm）、超凈工作臺
二、實驗步驟
第1天上午 ，Transwell 小室鋪膠
1）1:8 稀釋基質膠：100μL基質膠加入800μL無血清培養基，吹打混勻后，彈動 EP管使液體集中在管底（稀釋后的基質膠濃度參考1mg/mL，不超過3mg/mL； 稀釋比例并不固定，也可以取中間值1:4）。
2）混勻后立即吸取50μL稀釋后的基質膠到Transwell 小室上層，逐滴加入，液面厚度3mm，蓋上蓋子震板3-5次，使得每個小室上層液面平齊。
3）置于37℃培養箱中2-4h充分凝固。
4）使用前需進行水化，加入200μL無血清培養基水化30min（潤透即可，時間可延長）。
第1天下午，制備 Hela 細胞懸液以及細胞接種
1）提前一天更換為無血清培養基，將細胞饑餓12-24h，目的是為了去除血清的影響。
2）使用胰酶消化Hela細胞，終止消化后離心棄掉培養液，使用PBS清洗1-2次，使用含BSA 的無血清培養基重懸調整Hela 細胞密度為5×104-5×105個/mL。
3）取100-200μL Hela細胞懸液加入Transwell小室上層。
4）在24孔板的下室加入600μL含20% FBS 的培養基。
注：添加時需避免下室中的培養液和小室間產生氣泡，如有氣泡會影響下層培養液的趨化作用，使其減弱甚至消失。
5） 于 37℃ 5% CO2培養箱中培養12-48h（培養時間依據癌細胞的侵襲能力而定）。
第3天上午，染色及統計
1）取出 Transwell 小室棄去孔中培養液，使用棉簽輕輕擦拭上層未遷移的細胞。使用不含鈣鎂離子的 PBS 緩沖液清洗2次。
2）使用4%多聚甲醛對細胞固定30min，或使用75%乙醇固定10min。
3）棄掉固定液，PBS清洗3次，加入適量0.1%結晶紫染色液室溫染色30min。
4）染色完成后使用去離子水進行清洗，直至清洗液無明顯紫色。于200×和 400×顯微鏡下觀察并拍照統計。
三、實驗結果
培養 48h 后 Hela 細胞結晶紫染色結果，遷移到 PET 膜下層的 Hela 細胞數量較多。
200×
400×
四、產品推薦
| 產品歸類 |
產品名稱 |
貨號 |
規格 |
| 基質膠 |
Arcegel Matrix LDEV-Free；Arcegel基質膠，無LDEV |
C231001 |
5 mL/10 mL |
|
Arcegel Matrix Phenol Red-Free, LDEV-Free； Arcegel基質膠，無酚紅，無LDEV |
C231002 | 5 mL/10 mL | |
| 培養基 | C231115 | 500 mL | |
| C231114 | 500 mL | ||
| 緩沖液 | C230135 | 500 mL |