1. 動脈粥樣硬化簡介
目前，心腦血管疾病在人群中的發病率越來越高，其發病基礎主要是動脈粥樣硬化（atherosclerosis,AS）。動脈粥樣硬化是一種慢性進行性疾病，發病機理非常復雜，目前尚未明了，有多種學說從不同角度來闡明，諸如脂肪浸潤學說、血栓形成和血小板聚集學說、損傷反應學說和克隆學說等，近年來，內皮損傷學說逐漸被公認。即多種因素使內皮細胞受損，使動脈內膜的完整性受到破壞，加上脂質代謝紊亂，血液中的脂蛋白從受損的內皮細胞進入動脈壁，引起平滑肌細胞的增生，隨著脂質的不斷沉積和平滑肌細胞的持續增生，并經過一系列復雜的連鎖反應和惡性循環形成動脈硬化。盡管現代醫學的不斷發展為其治療提供了很多選擇，但它仍然是世界范圍內的造成死亡的主要原因之一，因此，研究動脈粥樣硬化的發病機制及其影響因素尤為重要。
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2. PCSK9簡介及其在動脈粥樣硬化中的作用?
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?圖1. PCSK9與肝細胞LDLR結合
（Alkindi M, Siminovitch KA,et al. Can J Cardiol, 2016）
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3、AAV-PCSK9造模方法?
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實驗動物 |
C57BL/6NTac小鼠 |
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病毒名稱 |
AAV8-D377Y-mPCSK9 & AAV8-D374Y-hPCSK9 |
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病毒用量 |
2×10E10vg（●）1×10E11vg（■）5×10E11vg（▲） |
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注射方式 |
單次尾靜脈注射 |
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建模方法 |
次日喂食西方飼料（含21%的脂肪和0.21%的膽固醇）或Paigen飼料（含16%的脂肪、1.25%的膽固醇和0.5%的膽酸鈉）12周 |
?PCSK9的功能獲得性突變PCSK9DY可以誘發高膽固醇血癥，研究表明，PCSK9DY與 LDLR的體外親和性相比野生型 PCSK9至少高出10倍， 其誘發高膽固醇血癥的作用更強。為了實現長期的高膽固醇血癥，研究者將不同劑量的重組腺相關病毒載體（人源及小鼠PCSK9DY載體設計圖見圖2）注射至C57BL/6NTac小鼠中，然后進行高脂飲食，12周后，小鼠出現動脈粥樣硬化，主要表現在主動脈弓或主動脈根（圖3）。
圖2. PCSK9DY載體示意圖
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圖3. AAV-PCSK9DY誘導小鼠動脈粥樣硬化
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（Bjorklund，M .M ., et al. Circulation Research, 2014）
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?4、維真AAV-PCSK9應用實例
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實驗動物 |
8周齡雄性HuRsmko小鼠 |
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病毒產品 |
rAAV/D377Y-mPCSK9 |
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注射方式 |
單次尾靜脈注射 |
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病毒用量 |
1.5×1011 |
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造模方法 |
喂食Paigen飼料12周 |
? ? ? ? ?為研究HuR在AS中的作用機制，研究人員構建了平滑肌特異性HuR基因敲除（HuRsmko）小鼠模型，然后注射rAAV/D377Y-mPCSK9載體并喂食Paigen飼料12周以誘導動脈粥樣硬化。發現HuRsmko小鼠的動脈粥樣硬化表面病變比例明顯高于對照組，且主動脈根病變面積顯著增加。同時，HuR的缺失增加了巨噬細胞的積累和基質金屬酶2（MMP2）的水平，降低了膠原含量，表明VMSC中HuR的缺失促進了動脈粥樣硬化的發展（圖4）。
圖4. 平滑肌細胞中HuR缺失加重動脈粥樣硬化
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5. 維真AAV-PCSK9現貨供應
?隨著研究的不斷深入，PCSK9腺相關病毒注射配合高脂高膽固醇飲食，已經逐漸成為動脈粥樣硬化的理想造模方式。
維真生物擁有人源、鼠源過表達PCSK9腺相關病毒（AAV-PCSK9），供動脈粥樣硬化研究者造模使用，現貨供應，質量有保證。詳情垂詢【400-077-2566】或添加【維真小助手微信號WZ4000772566】咨詢。關注維真生物，讓維真產品助您科研一路順暢！
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