摘要：視網(wǎng)膜的病理性血管增生是失明的主要原因，但是靶向血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子的視網(wǎng)膜血管疾病顯示出了顯著的局限性。因此，研究新型抗血管生成疾病并能篩選出合適藥物的視網(wǎng)膜血管增生的實驗?zāi)Ｐ腿允侵陵P(guān)重要。
視網(wǎng)膜和脈絡(luò)膜血管新生通常是嚴(yán)重眼部疾病視力喪失的主要原因，該類疾病包括早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變（ROP），糖尿病性視網(wǎng)膜病變（DR），年齡相關(guān)性黃斑變性（AMD）和視網(wǎng)膜靜脈阻塞（RVO）等。ROP是西方兒童失明的主要原因，治療方法包括通過冷凍或激光消融等。
促血管生成因子在增殖性視網(wǎng)膜病的發(fā)病機制中發(fā)揮的作用是至關(guān)重要的，其中血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）是被研究最多的。因此，用抗VEGF的活性物質(zhì)治療該疾病便可以作為一種傳統(tǒng)激光手術(shù)的替代方法。
雖然也有多個VEGF阻斷劑已被開發(fā)，如哌加他尼（pegaptanib），雷珠單抗（ranibizumab）和阿帕西普（aflibercept）和貝伐單抗（bevacizumab）等，但是因為VEGF途徑的復(fù)雜性，相對的副作用也非常多。雖然視網(wǎng)膜血管增生研究已經(jīng)在各種小鼠模型中被廣泛地研究，尤其是其中的藥理學(xué)研究。然而，使用哺乳動物模型的高成本和養(yǎng)殖局限性都使其無法作為大規(guī)模篩選的工具。
斑馬魚是極典型的光照條件好，白晝活動并具較好視覺功能的熱帶魚類型。斑馬魚的眼從受精后11小時開始發(fā)育（視神經(jīng)原基出現(xiàn)），受精后72小時基本發(fā)育完全（可記錄視網(wǎng)膜電圖），受精后第6天便可完成與視功能相關(guān)的數(shù)個反應(yīng)。斑馬魚已被提議作為一個有效的替代動物模型用于血管形成機制研究，包括基本的生理和病理研究。
環(huán)特生物通過這一原理成功摸索出了斑馬魚眼部血管增生模型，并用陽性藥七葉洋地黃雙苷、貝伐單抗成功地進(jìn)行了模型的驗證。通過在轉(zhuǎn)基因血管綠色熒光斑馬魚品系斑馬魚觀測眼部血管面積、眼組織病理學(xué)和hif基因的表達(dá)來篩選有效的抗血管活性物質(zhì)。
▲造模后斑馬魚眼部血管面積明顯↑，加入陽性藥后有明顯的改善效果
▲斑馬魚眼部病理切片圖
▲hif基因的表達(dá)