傳統癲癇藥物篩選依賴動物模型,通量低、成本高。愛思益普整合高通量篩選技術,建立了從體外初篩到體內驗證的快速發現體系,顯著提高篩選效率。
體外高通量篩選是快速發現的關鍵。平臺采用FLIPR熒光檢測系統,在96/384孔板中同步檢測數千個化合物對離子通道或受體的活性。針對KCNQ2/3通道,采用鉈離子通量檢測;針對GABA_A受體,采用氯離子敏感熒光蛋白檢測;針對谷氨酸受體,采用鈣敏感熒光染料檢測。這種高通量初篩,每日可處理數千個數據點,快速鎖定苗頭化合物。
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細胞水平表型篩選評估功能活性。平臺建立了原代神經元癲癇樣放電模型:通過無鎂培養液或GABA受體拮抗劑,誘導神經元產生同步化放電,模擬癲癇的神經網絡活動。采用多電極陣列(MEA)記錄,實時監測放電頻率、同步化程度、爆發間隔等參數,評估化合物的抑制作用。這種表型篩選保留了細胞網絡的復雜性,提高了臨床預測價值。
斑馬魚癲癇模型實現中通量體內篩選。斑馬魚具有繁殖快、通量高、遺傳背景清晰的優勢。平臺采用戊四唑或電刺激誘導斑馬魚幼體癲癇樣行為,通過自動化行為分析系統,定量評估化合物的抗癲癇效應。這種模型兼具體外通量與體內相關性,適用于大規?;衔飵斓目焖俸Y選。
篩選數據整合指導結構優化。平臺將高通量篩選數據與分子對接、QSAR模型整合,建立結構-活性關系(SAR),指導藥物化學家進行結構優化。通過迭代篩選-優化循環,快速獲得活性強、選擇性高、成藥性好的候選分子,顯著縮短研發周期
