細胞增殖是指細胞在周期調控因子的作用下,通過DNA復制、RNA轉錄和蛋白質合成等復雜反應而進行的分裂系列過程。
對細胞的增殖進行檢測,是一種對生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗,以及腫瘤放射敏感性測定等,不可或缺的實驗手段。目前主要有兩種方式檢測細胞增殖能力的方法:一種是直接的方法,通過直接測定進行分裂的細胞數來評價細胞的增殖能力。例如:BrdU細胞增殖檢測;EdU細胞增殖檢測。另一種是間接的方法,即細胞活力檢測方法,通過檢測樣品中健康細胞數目來評價細胞的增殖能力。例如:MTT法、CCK8試劑盒法以及CTG法。
CTG法
ATP腺嘌呤核苷三磷酸(簡稱三磷酸腺苷)參與生物體內多種酶促反應,是活細胞新陳代謝的一個指標,其含量直接反應了細胞的數量及細胞狀態:實驗過程中向細胞培養基加入CellTiter-Glo試劑,利用外源的螢火蟲熒光素與熒光素蛋白,以細胞內的ATP作為能量來源 消耗ATP發出熒光,測量發光值,在光信號和體系中,發光值與ATP量成正比,而且CTG 發光法通過 ATP 含量來進行細胞計數或活力測定不受化合物自發熒光的影響。同普通的MTT和CCK8相比,CTG法具有反應靈敏、反應快以及能持續較長的信號持續時間等優點,是細胞增殖測定,細胞活力測定和細胞毒性高通量篩選分析的理想選擇。
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