Casitas B lymphoma-b (CBL-B)是一種 E3 泛素連接酶，最初被表征為原癌基因，但現在被理解為在調節效應 T 細胞功能中起核心作用。在沒有 CD28 共刺激的情況下，CBL-B已被確定為 T 細胞活化的關鍵抑制劑。通過信號轉導的復雜相互作用，CBL-B抑制 T 細胞轉錄活性并促進先天性和適應性免疫的免疫耐受性。CBL-B特異性 siRNA 的小分子抑制劑為治療免疫相關疾病（包括自身免疫性疾病、播散性念珠菌病和腫瘤）提供了一個有前途的治療靶點。它也是小分子抑制劑有吸引力的靶標。

Cbl 蛋白家族由一個保守的 N 端酪氨酸激酶結合 （TKB） 結構域、一個短連接子區域和一個無名指 （RF） 結構域，如下圖。TKB結構域由一個4螺旋束（4H）、一個帶有EF手折疊的鈣結合結構域和一個變異Src同源區2（SH2）結構域組成，這三者都是形成獨特的磷酸酪氨酸結合（PTB）模塊所必需的。TKB 結構域可識別并結合含有 ZAP-70 和 Syk 等蛋白質中特定磷酸酪氨酸基序的底物蛋白。具有內在 E3 連接酶活性的保守 RF 結構域可以募集 E2 Ub 結合酶，并介導 Ub 向靶底物的轉移。RF結構域的結構完整性對于Cbl蛋白作為E3 Ub連接酶的功能是必不可少的。Cbl 蛋白的 C 末端區域不太保守，并且包含富含脯氨酸 （PR） 的區域，介導其與含 SH3 的蛋白質的結合。c-CBL和CBL-B的C-末端，有一個保守的結構域，稱為泛素相關（ubiquitin-associated （UBA）結構域。UBA結構域能夠相互作用，這使得c-Cbl和Cbl-b之間的同源二聚化和異源二聚化成為可能。

產品及服務

1.CBL-B相關蛋白

2.CBL-B Activity Assay

3.CBL-B & c-CBL displacementassay

4.CBL-B& c-CBLELISAassay

5.CBL-B & c-CBL SPR assay實驗原理

1.CBL-B Activity Assay

正常情況下，帶有標簽的CBL-B在ATP存在下發生被SRC磷酸化，磷酸化后和泛素結合酶E2-Ub結合，加入檢測試劑（Streptavidin - Tb）和anti-flag-d2 antibody后可以檢測到高的HTRF信號值，若化合物抑制CBL-B作用將不會和E2-Ub結合，也就不會有HTRF的信號。

1.CBL-B Displacement Assay

CBL-B蛋白帶有Biotin的標簽，底物為帶有熒光基團的CBL-B抑制劑。正常情況下，當帶有熒光基團的抑制劑和CBL-B蛋白結合時，實驗體系中加入帶有Streptavidin標簽的Tb，當有337nm的激發光時，鑭系元素Tb在490nm處會有一個發射光，同時會發生熒光共振能量轉移，在 520nm也會有一個發射光；當有化合物加入時，和帶有熒光基團的抑制劑競爭性結合蛋白，兩者分離后，在520nM處就檢測不到熒光信號。

1.CBL-B ELISA assay

正常情況下，帶有Biotin標簽的CBL-B在ATP存在的情況下被SRC-ZAP70磷酸化，磷酸化后和泛素結合酶E2結合,洗掉未被結合的組分后加入帶有Streptavidin標簽HRP，加入TMB后可檢測到高的化學發光值。當抑制劑和CBL-B預孵育后，CBL-B活性被抑制將不會和E2結合，經過洗滌的過程后加入SA-HRP，將檢測不到化學發光值。

1.SPR assay

表面等離子共振（SurfacePlasmonResonance,SPR）是一種物理光學現象，被廣泛應用于生物分子相互作用的檢測。是利用金屬（通常是金）表面上的自由電子與入射光發生共振，形成表面等離子波。當這些等離子波與入射光的特定條件（如入射角和波長）相匹配時，會發生共振，導致反射光強度的顯著減弱。這種共振條件對金屬表面的折射率非常敏感，因此當有生物分子與金屬表面的薄膜結合或與已吸附的分子相互作用時，會導致共振角度發生偏移，從而可以監測到這種變化。